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两天5篇《Nature》!Incucyte杀疯了……

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2024/11/5 9:45:51

长时程活细胞成像系统Incucyte®因其简便的实验设置和分析流程、以及广泛的应用方向,深受用户喜爱。在体外细胞水平的实验中发挥着重要作用。引用其数据的CNS正刊上论文数量众多,目前使用到Incucyte®发表的CNS正刊总数已经达到约200篇,往期链接如下:

 

活细胞成像刷屏!一天两篇CELL揭秘神经退行性疾病和肿瘤免疫新疗法

一天三篇CNS,Incucyte® 开启细胞研究新速度

一周3篇Nature:Incucyte® 上演科研帽子戏法!

最近的2024年10月,利用Incucyte® 发CNS正刊的数量又达到了新高度,两天5篇NATURE!

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他们又是如何应用Incucyte® 的呢?

 

NATURE

免疫细胞和靶细胞共培养[1]

 

中毒性表皮坏死松解症(TEN)是一种由常见药物诱导的致命皮肤反应,已成为一个新兴的公共卫生问题。TEN患者会因角质形成细胞死亡,而出现严重和突然的表皮脱离。通过蛋白质组学分析,发现TEN患者免疫细胞和角质形成细胞区室中I型和II型干扰素的显著富集。Incucyte® 体外实验发现,使用JAK抑制剂托法替尼( tofacitinib)降低了角质形成细胞的细胞毒性。体内口服给药改善了两种不同的TEN小鼠模型的临床和组织学疾病严重程度。

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图1. Incucyte® 测试:自体共培养模型中,活化的外周血单核细胞(PBMC)在5小时内有效杀死角质形成细胞,并且这种作用被托法替尼以剂量依赖性方式抑制。每隔两个小时测试一次,对死亡的角质形成细胞进行统计。

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Incucyte® 有多个板位,可以满足多个实验组的高通量测定。

NATURE

细胞凋亡[2]

三阴性乳腺癌 (TNBC)因其高度侵袭性和高复发率而令人谈虎色变,迫切需要开发更有效的治疗方法。本文发现,AKT抑制剂与组蛋白甲基转移酶EZH2抑制剂的药物具有协同作用,并在体内多个TNBC模型中促进持续的肿瘤消退,明确了其药理作用。Incucyte® 被用于体外检测药物对肿瘤细胞系的杀伤作用。

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图2. Incucyte® 测试结果:NucLight Rapid Red试剂 (Sartorius,4717)标记细胞,用Cytotox Green (Sartorius,4633)监测细胞毒性。每2小时采集一次图像,持续5天。使用Incucyte®软件通过量化overlay的NucLight-red和Cytotox-green双阳性细胞数(即死亡的细胞数)除以 NucLight-red 阳性细胞的总数来确定细胞毒性细胞的百分比。

 

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Incucyte®有完善的活细胞试剂,并提供相应的protocol,以及overlay分析等软件功能。

 

NATURE

划痕实验[3]

人类产前皮肤由先天免疫细胞(包括巨噬细胞)组成,但这些细胞是否仅在免疫方面发挥作用,还是在形态发生中具有其他功能,尚不清楚。本文汇编了一份全面的产前人类皮肤多组学参考图谱,结合单细胞和空间转录组学数据,表征了皮肤的微解剖组织生态位。该图谱揭示了非免疫细胞和免疫细胞之间的串扰是毛囊形成的基础,与无疤痕伤口愈合有关,对皮肤血管生成至关重要。

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图3. Incucyte® 划痕测试:成纤维细胞与巨噬细胞共培养可以增加伤口愈合。

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Incucyte® 有专门的工具可以方便的创造一致的划痕。

NATURE

两种细胞的竞争[4]

晚期尿路上皮癌(UC)是一种经常致命的疾病,具有显著的遗传异质性。化疗会诱导数百个晚期亚克隆突变的爆发。通过基因组计算工具观察到,形成染色体外DNA (ecDNA)的SV(复杂结构变异)具有频繁的高拷贝数环状扩增子特征,例如尿路上皮癌中的大多数 CCND1(G1/S-特异性周期蛋白-D1基因),并包含额外的DNA片段并导致治疗耐药性的进化。在竞争试验中,在顺铂或载体对照存在下,共培养等数量的具有GFP标记的空载体和mCherry标记的CCDN1游离型ecDNA的UMUC1细胞(CCDN1 UMUC1),使用Incucyte®活细胞成像系统测量 mCherry/GFP荧光信号的比率来监测对化疗的适应性。

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图4. 用Incucyte®监测4天的mCherry/GFP细胞比例示意图(6个小时拍摄一次),以追踪肿瘤细胞对化疗的适应性


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图5. CCND31 UMUC1细胞与对照细胞的比率,化疗药物顺铂的处理组明显高于对照,说明CCND31 UMUC1细胞对化疗有更佳的适应性

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Incucyte®有多个荧光通道可以对多种细胞进行追踪。

 

这些文章看重了
Incucyte®什么优点呢?


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图片培养箱内可长达数周的连续观察,最短几分钟间隔拍摄,减少人力,防止过多操作对细胞的伤害和移动
图片多个板位,分别独立设置检测程序,可以兼容各种孔板和培养皿,通量高
图片具有划痕,肿瘤球,类器官,趋化,血管生成等多个分析拍摄模块,并配套相应的耗材
图片高效简便的模块化软件设置和数据分析,输出图片、视频、生长曲线等多指标多参数;捕捉细胞每个细节,使得结果更加准确
图片大于100种优化过的活细胞专用荧光试剂、耗材及详尽的Protocol
图片实验形式多样化:定性,两者结合,协同/竞争实验,垂钓
图片文章数大于16000篇,认可度高

只要放好您的细胞,其他交给Incucyte®吧!祝愿大家都能用Incucyte®发好文章!

 

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Incucyte®长时程活细成像系统应用文集

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-参考文献-

[1]Spatial proteomics identifies JAKi as treatment for a lethal skin disease | Nature

[2]AKT and EZH2 inhibitors kill TNBCs by hijacking mechanisms of involution | Nature

[3[A prenatal skin atlas reveals immune regulation of human skin morphogenesis | Nature

[4]The interplay of mutagenesis and ecDNA shapes urothelial cancer evolution | Nature

 

 

 

 

 

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