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DNA 恒温快速扩增试剂盒胶体金试纸条型使用说明书

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2024/11/5 17:06:36

【原理概述】 

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下(一般为 39 ºC~42 ºC), 在辅助蛋白和单链结合蛋白的帮助下,重组酶和引物形成复合体;进行同源搜索并结合目的同源域,此时在该同源位置形成D-loop 区并开始进行链交换;伴随着重组酶从复合体上解离,聚合酶也结合到引物的 3’末端,开始链的延伸。依赖nfo 酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用胶体金技术(三明治夹心法)可以对最终结果进行检测。


组成含量
A buffer
1.6ml/管*1
B buffer0.15ml/管*1
正对照模板-II0.1ml/管*1
正对照引物探针 Mix-II0.07ml/管*1
试剂48T
使用说明书1份



【产品特点】 

本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时 间短(仅需 15 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。 本试剂对设备要求低,金属浴、水浴锅等即 可进行反应操作,无需购买 PCR 扩增仪等 价格高昂的专属设备。

【引物设计】 

建议使用长度在30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;下游引物的 5’端标记一个修饰基团(常用生物素)。引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩 增子长度建议在150-500 bp。

【胶体金探针设计】

在上下游引物中间,设计一段长度为46-52nt 与目的片段互补的序列;5’端修饰一个抗原 标记(典型 FAM);在 5’端和 3’末端的中部 位置标记一个 dSpacer(四氢呋喃,THF), 作为 nfo 的识别位点;3’末端标记一个修饰 基团,例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer 等。

【试剂盒储存】 

1.储存条件:储存温度 ≤ -20 °C 恒温环境, 避光保存,避免重压; 

2.产品有效期:14 个月; 

3生产日期见外包装。


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