正-反二维液相色谱系统作为一种高效分离复杂样品的技术,在蛋白质组学、天然产物分析等领域得到了广泛应用。为了确保该系统的长期稳定运行和数据准确性,正确的维护与保养至关重要。以下是一些关键的养护方式:
1. 流动相管理
流动相的选择与配置
- 选择合适的溶剂:根据实验需求选择高纯度的溶剂,如乙腈、甲醇等,并确保溶剂无杂质、无水分。
- 混合均匀:使用前需充分混合流动相,以保证其均一性。
- 过滤与脱气:所有流动相必须经过0.45微米滤膜过滤,并超声脱气,以去除气泡和颗粒物。
流动相的更换与保存
- 定期更换:长时间使用的流动相可能会变质或受到污染,应定期更换新鲜流动相。
- 密封保存:未使用完的流动相应密封保存在阴凉处,避免光照和挥发。
2. 色谱柱的维护
色谱柱的选择
- 匹配系统要求:选择适合正-反二维液相色谱系统的色谱柱,确保其规格与系统兼容。
- 高品质柱子:优先选择品牌和高质量的色谱柱,以保证分离效果和使用寿命。
色谱柱的使用与保养
- 温和条件启动:新柱子使用时,应在较低流速下用流动相平衡,逐渐过渡到工作条件。
- 避免压力冲击:操作过程中避免突然增加压力,以防损坏色谱柱。
- 定期清洗:使用弱极性溶剂(如正己烷)清洗色谱柱,去除残留样品和杂质。
- 保存条件:不使用时应将色谱柱保存在适当的溶剂中,防止干涸和微生物生长。
3. 仪器的日常维护
输液泵
- 压力监控:定期检查输液泵的压力,如有异常升高应及时处理。
- 清洁维护:定期清洁泵头和单向阀,防止堵塞和磨损。
检测器
- 光源检查:确保检测器的光源正常工作,定期更换老化的灯管。
- 清洁流通池:保持检测器的流通池清洁,定期冲洗以防止污染。
自动进样器
- 针头保养:定期更换或打磨自动进样器的针头,保证取样精度。
- 样品盘清洁:保持样品盘干净无尘,避免交叉污染。
4. 系统的整体维护
定期校准
- 系统校准:定期对整个系统进行校准,包括泵的流量、检测器的响应等,确保数据准确。
软件更新
- 软件升级:及时更新控制软件,以获得最新的功能和改进。
故障排查
- 记录与分析:详细记录每次运行的数据和维护情况,便于故障发生时快速定位问题。
- 专业支持:遇到复杂问题时,寻求厂家或专业技术人员的帮助。