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2024/11/7 17:22:02蛋白纯化是利用蛋白质之间在物理和化学性质上的差异,如分子量大小、电荷、溶解度、疏水性、亲和性等,通过逐步进行层析、沉淀、电泳等步骤,最终实现对目标蛋白的纯化。
主要有:
体积排除色谱;
亲和层析法;
离子交换层析法;
电泳法等。
在实际操作中,通常需要根据目标蛋白的性质和实验需求,灵活选择并组合使用不同的分离纯化方法,以形成分步分离纯化的策略,以达到更高的纯度和产量。
在实验生产中,经常需要同时处理多个蛋白样品。如在药物研发过程中,需要大量制备高纯度、高活性的药物蛋白。这些蛋白可能是药物本身,也可能是药物研发的重要靶标或工具。通过高通量纯化,可以加速药物候选物的筛选和验证过程,提高药物研发的成功率。在生物治疗领域,如基因治疗、细胞治疗等,需要制备高质量的生物制剂。这些制剂需要高纯度和高活性,以确保治疗的安全性和有效性。高通量纯化技术能够满足这些要求,为生物治疗提供有力支持。但是使用手动操作进行高通量纯化实验不仅费时费力,且容易引入人为误差,在手动实验过程中,交叉污染也是一个需要重点关注的问题。
瑞孚迪(Revvity)的自动化移液工作站能够并行处理多个样品,大幅提高纯化效率,同时还可以解决手动进行高通量蛋白纯化所遇到的所有难点。工作站通过精确编程和传感器控制,可以实现高精度的移液操作,减少体积误差,这对于需要严格,控制反应物比例的纯化步骤尤为重要;通过程序控制操作过程,减少了人为因素带来的误差;通过一次性吸头、自动清洗等功能,降低了交叉污染的风险。
图1
在实际实验生产过程中,我们可以根据所需纯化的样品体积与样品数量来选择自动化方案。图1所描述的多种自动化纯化方案均可在瑞孚迪自动化移液工作站中实现。
Janus G3平台
Fontus平台
在完成高通量蛋白纯化后,还可使用Labchip GXII进行蛋白分析。
LabChip GXII Touch 24:低通量(1-24个样本/run)
LabChip GXII Touch HT:高通量(1-96或384个样本/run)
基于微流控毛细管 Lab-on-Chip 技术
上样、分离、染色脱色、检测、清洗、分析自动化
速度快:28-80s/sample
基于微流控毛细管 Lab-on-Chip 技术
生物大分子药物研发和生产过程的筛选与质控
抗体及其他生物类似物的浓度、纯度、糖基化、聚合等指标分析
蛋白质大小及定量
蛋白表达和优化
单克隆抗体生产
重组蛋白定量
糖谱分析