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Inertsil SIL-100A色谱柱操作说明

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2024/11/12 8:35:49

1.色谱柱信息

  Inertsil SIL-100A采用了我公司专利技术合成的高纯硅胶,无键合相,是典型的正相柱,独特的活化方法,得到可控的硅胶表面,金属含量极少,表面积,微孔径也都得到极好的控制,可以实现稳定的正相分析,主要用于一些脂溶性、中等极性或者极性较大的非离子性化合物的分离。Inertsil SIL-100A液相色谱柱从硅胶基质的合成,到化学处理和装填后的性能检测,都是在本公司严格的产品控制下进行,因此不同批次的柱与柱之间具有优异的重现性;通过独有的装填技术填装的氰基柱柱床密度均一稳定,从而确保色谱柱具有高柱效。

  为了能长期保持Inertsil SIL-100A液相色谱柱的优越性能和正确的使用色谱柱,在使用色谱柱之前请仔细阅读本说明书。

 

2.使用前的检查与须知事项

检查包装箱的外观有无异常。

●打开包装,检查色谱柱的填料名称、尺寸规格、连接形式是否相符。

●色谱柱中封存流动相为正己烷/乙醇=982v/v

 

3.色谱柱填料规格

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4.色谱柱安装与操作

  色谱柱在运输过程中,两端用堵头密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时,首先请确保系统中的溶剂和液相柱中封存溶剂是互溶的。如果不能互溶,请采用一种能够与系统及色谱柱都能互溶的溶剂(e.g.异丙醇)对系统进行充分过渡之后再将色谱柱连接到系统中,并注意流动相的方向要与柱上标记的方向保持一致。我公司提供的常规液相色谱柱标准接头型式为

1/16英寸Waters接头螺丝型(如下左图),同时还有耐高压液相系统的UP(如下右图)(目前SIL-100A柱暂不提供UPLC)。如果需要其他接头形式请另行咨询。

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  色谱柱连接好之后,请确认无漏液现象之后再进行后续操作。

  新的SIL-100A柱是保存在正己烷/乙醇(982v/v)的溶液中,在储存和运输过程中,硅胶填料可能会干涸,用于正相分离模式,正相柱的平衡时间一般较长,直接用正己烷/乙醇(982v/v)冲洗至少50倍柱体积活化,流速从0.1mL/min缓慢上升到最佳流速,然后用流动相平衡之后再进样分析(如果在活化过程中即发现压力和基线不正常时,请及时联系我公司工程师处理。)

 

5.样品与流动相

  为避免色谱柱堵塞,所有样品及溶剂,包括缓冲溶液在内,在使用前必须用0.45μm或者0.22 μm的滤膜过滤。在正相色谱中,固定相的水分含量常常是影响选择性的关键因素,大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分(正己烷20℃水分含量是0.0111% w/w),如发现色谱柱保留性能发生变化,可用流动相低流速长时间充分平衡。

 

6.色谱柱的保养

pH SIL-100A柱可在pH2~7.5范围内使用,为保持色谱柱良好的寿命,请避免较强的酸或碱性样品或者流动相进入色谱柱。

耐压 常规柱耐受压力为20MPaHP系列耐压为50MPa,但是正常的压力建议控制在耐受压力的2/3以下。长时间在高压下运行会对色谱柱造成难以修复的损害,因此系统压力升高之后,建议尽快排查系统,如果是色谱柱压力升高,请及时采用适当溶剂冲洗色谱柱。

温度 最高操作温度为60℃,长时间在高温下操作会显著降低色谱柱寿命。

冲洗

正相模式清洗步骤:

1.每次清洗都用低流速起步,当检测到柱压稳定在一定水平后再增加流速;

2.先用10倍柱体积不含其它添加剂的流动相中的弱溶剂,如正己烷、氯仿等冲洗色谱柱;

3.50柱体积的诸如乙酸乙酯,二氯甲烷或异丙醇等流动相中的强溶剂冲洗色谱柱。此外,也可以根据样品基质特点,选择对基质溶解性较强的溶剂冲洗。

储存 色谱柱长期不用,建议冲洗方法完成之后,保存在与出厂封存溶剂相同的流动相中.之后卸掉色谱柱,两端用堵头密封,并放在温度变化小的场所。


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