质粒pYES2的筛选标志为URA，可用SD-URA板板进行筛选。BY4742感受态细胞经特殊工艺制作，pYES2质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。
操作说明：
1、取一支无菌的1.5mlEP管，依次加入预冷的目的质粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重复一次)，100µl冰上融化的AH109感受态细胞，PEG/LiAc500µl，轻轻翻转混匀6-8次；
2、30℃水浴30min，每10min轻轻翻转混匀6-8次；
3、每支加入20µl的二甲基亚砜；（用于提高转化效率，可不做）
4、42℃水浴15min，每5min轻轻翻转混匀6-8次；
5、12000rpm瞬时离心弃上清，每支加入1ml的YPDPlus于30℃复苏1h；（用于提高转化效率，可不做）
6、12000rpm瞬时离心弃上清，用100µl0.9%NaCl重悬，涂板，30℃培养48-96h。
注意事项：
1、感受态细胞最好在冰上融化。
2、若使用pYES2质粒表达蛋白，需在培养基中加入2%的半乳糖（筛选培养基中不用加半乳糖；当需要目的蛋白表达时，需加入半乳糖代替葡萄糖作为碳源），以诱导目的基因的表达。
3、转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4、同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。
5、酵母为真核生物，不易长期保存，随感受态在-80℃保存时间的延长，转化效率会不断下降，建议保存时间不超过90天。
6、BY4742酵母菌株对高温敏感，适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
7、酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。
