造成细胞污染的微生物主要包括细菌、真菌、支原体、病毒以及外源性细胞。这些微生物可以通过实验室环境、实验材料、操作人员或实验设备等途径进入细胞培养系统，导致细胞培养物的污染。以下列举了一些常见的造成细胞污染的微生物及其特点，一起来学习下吧！
细菌污染
1. 大肠杆菌（Escherichia coli）
① 形态特点：为革兰氏阴性短杆菌，大小约 0.5 - 0.7μm×1 - 3μm，细胞呈杆状，两端钝圆，多数单独存在或成双排列。
② 生长特性：是兼性厌氧菌，在有氧和无氧环境下都能生长。在细胞培养基中生长迅速，能利用多种糖类作为碳源。一般在适宜温度（37℃）下，几个小时内就可以使培养基变得浑浊，它会消耗培养基中的营养成分，产生酸性代谢产物，使培养基的 pH 值下降。
③ 对细胞的影响：产生的内毒素和外毒素会破坏细胞的结构和功能，导致细胞肿胀、破裂和死亡。例如，在哺乳动物细胞培养中，大肠杆菌污染会使细胞形态发生改变，细胞之间的连接被破坏，细胞的正常代谢和增殖活动受到严重干扰。
2. 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
① 形态特点：属于革兰氏阳性菌，呈球形，直径约 0.8 - 1.2μm，在显微镜下常以葡萄串状排列，无芽孢、鞭毛，多数无荚膜。
② 生长特性：是需氧或兼性厌氧菌，对营养要求不高，在普通的细胞培养基中能很好地生长。生长速度较快，适宜温度为 37℃左右，能在培养基表面形成光滑、湿润、边缘整齐的圆形菌落。
③ 对细胞的影响：它能产生多种毒素，如溶血毒素、杀白细胞毒素等，这些毒素会导致细胞死亡。而且金黄色葡萄球菌还能在细胞表面黏附并形成生物膜，干扰细胞与外界的物质交换和信号传递，影响细胞的正常生理功能。
3. 假单胞菌（Pseudomonas）
① 形态特点：革兰氏阴性菌，细胞呈直或稍弯的杆状，大小约 0.5 - 1μm×1.5 - 5μm，有单端鞭毛，能运动，无芽孢。
② 生长特性：是需氧菌，对营养要求相对较低，在潮湿环境下生长良好。在细胞培养基中，它可以利用多种有机化合物作为碳源和能源，生长速度快，在 25 - 37℃的温度范围内都能繁殖，能使培养基迅速变浑浊。
③ 对细胞的影响：假单胞菌产生的一些酶和毒素，如蛋白酶、脂酶和外毒素等，会分解细胞成分，破坏细胞的膜结构，导致细胞裂解死亡。
真菌污染
1. 黑曲霉（Aspergillus niger）
① 形态特点：属于丝状真菌，菌丝有分隔，多核。分生孢子梗从特化了的厚壁而膨大的菌丝细胞（足细胞）垂直生出，顶部膨大成球形的顶囊，顶囊表面长满一层或两层辐射状小梗，最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子。在显微镜下可以看到黑色的孢子头，这是其典型的特征。
② 生长特性：是好氧菌，在较宽的温度范围（10 - 45℃）和 pH 范围（2 - 9）内都能生长。在细胞培养环境中，它可以在培养基表面、培养瓶壁等地方生长，形成黑色的菌斑。黑曲霉能利用多种碳源和氮源，如糖类、蛋白质等，生长过程中会产生大量的菌丝，这些菌丝会在培养基中蔓延。
③ 对细胞的影响：黑曲霉的菌丝生长会消耗培养基中的营养成分，改变培养基的物理和化学性质。同时，它还可能产生一些毒素，如黄曲霉毒素（虽然黑曲霉产生黄曲霉毒素的情况相对较少）和其他次生代谢产物，这些物质会对细胞产生毒性作用，抑制细胞生长，甚至导致细胞死亡。
4. 白色念珠菌（Candida albicans）
① 形态特点：是一种酵母样真菌，细胞呈卵圆形，大小约 2 - 6μm×3 - 9μm，在适宜的环境下，以出芽方式繁殖，形成芽生孢子。在玉米 - 吐温 80 培养基等特定培养基上，可形成假菌丝。
② 生长特性：是兼性厌氧菌，在有氧和无氧环境下都能生长。它可以在含有葡萄糖、酵母提取物等营养成分的培养基中良好生长，适宜生长温度为 37℃左右，这和哺乳动物细胞培养温度相似。白色念珠菌在培养基中生长时，会使培养基变得浑浊，同时在表面可能形成白色的菌膜。
③ 对细胞的影响：白色念珠菌能黏附在细胞表面，通过分泌一些水解酶，如蛋白酶、磷脂酶等，破坏细胞的细胞膜和细胞壁，侵入细胞内部，影响细胞的正常功能，导致细胞死亡。而且它还可能引起细胞的免疫反应，进一步加重对细胞的损害。
支原体污染
特点：
① 支原体是一类没有细胞壁的原核微生物，大小介于细菌和病毒之间，一般在 0.2 - 0.3μm 之间。形态多样，有球形、丝状、分枝状等。由于没有细胞壁，它们具有高度的多形性，在不同的生长条件下可以改变形状。
② 支原体是最小的能够独立生活的原核生物，对营养要求苛刻，需要从宿主细胞获取胆固醇、脂肪酸、氨基酸等营养物质。它们可以在细胞表面或者细胞内寄生，生长速度相对较慢，在细胞培养中不易被察觉。
③ 支原体污染会对细胞产生多种不良影响。它会消耗细胞培养基中的营养成分，改变培养基的 pH 值，影响细胞的生长速度，使细胞生长缓慢甚至停滞。同时，支原体还能改变细胞的基因表达和代谢途径，干扰细胞的信号转导，导致实验结果的偏差。例如，在细胞转染等实验中，支原体污染可能会使转染效率降低，影响基因表达的研究。
