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2024/11/21 16:24:06FGF-23 ELISA试剂盒/Human FGF-23 ELISA Kit检测原理:
FGF-23 ELISA试剂盒是用于测量血清中FGF-23的双位点酶联免疫吸附测定试剂盒。两种特异性小鼠单克隆抗体结合全长FGF-23。其中一种抗体固定在微量滴定板上进行捕获。另一种抗体与HRP(辣根过氧化物酶)缀合用于检测。
在这个反应中,将含有FGF-23的样品与固定在微量滴定孔的抗体一起培养。用抗体捕获样品中的FGF-23。在该反应结束时,洗涤该孔以去除未结合的FGF-23和其他组分。
在第二个反应中,将这种固定的FGF-23与HRP标记的抗体一起温育以形成“三明治”复合物:抗FGF-23抗体 - N端FGF-23C端-HRP标记的抗FGF-23抗体。在该反应结束时,洗涤该孔以除去未结合的组分。
在酶反应中,将固定在孔上的夹心复合物与底物溶液一起孵育,然后用分光光度微量滴定板读数器测量。与孔结合的复合物的酶活性与样品中FGF-23的量成正比。通过绘制吸光度与FGF-23标准品各浓度的关系绘制标准曲线。从该曲线确定样品中FGF-23的浓度。
艾美捷FGF-23 ELISA试剂盒/HumanFGF-23 ELISA Kit:
中文名称:FGF-23 ELISA试剂盒(Kainos CY-4000)
英文名称:HumanFGF-23ELISAKit
品牌:Kainos Laboratories
货号:CY-4000
规格:96T
反应种属:Human
样本类型:Serum
FGF-23 ELISA试剂盒/Human FGF-23 ELISA Kit组成:
1)FGF-23抗体包被微孔板(FGF-23板)
用抗FGF-23的鼠单克隆抗体包被微孔板96孔微孔板。
2)HRP标记的FGF-23抗体(FGF-23缀合物)
12mL与辣根过氧化物酶缀合的FGF-23的鼠单克隆抗体与防腐剂混合。该试剂应储存在2-10℃并避光。
3)FGF-23校准液(STD1~std7)
用防腐剂缓冲FGF-23的FGF-23标准品(Std1-Std7)12mL(Std1)和0.5mL(Std2-Std7)。7瓶含有防腐剂的缓冲碱的FGF-23。
4)测定稀释剂(AssayDiluent)
12mL缓冲液。
5)显色剂(底物)
12mL四甲基联苯胺TMBZ)与过氧化氢脲。
6)FGF-23清洗缓冲液(10倍浓缩)
53毫升缓冲表面活性剂与防腐剂的10倍浓缩溶液。使用前,用去离子水将内容物稀释至10倍并充分混合。
7)终止液(终止液)
12mL0.5mol/L硫酸。
8)封板器
试剂盒中包含密封板三。
注:这些试剂应在黑暗中储存在2-10℃。使用前将所有试剂置于室温下。
使用注意事项:
1)测试样品的储存条件是什么?
使用鲜的血清样本。如果您无法立即测试您的样品,请将其存放在-70°C以下。避免解冻/重新冷却循环。
在我们的实验室测试中,在冰箱中13天后,给定样品的活性降至86.6%。样品在-80°C下可保持稳定约三年,但在-20°C时稳定性不能得到保证。
我们已确认zui多六次解冻/再次冻结循环可能不会影响活动,但我们建议小批量冻结样本,以尽量缩短解冻/再次冻结周期。
2)试剂盒检测的样本
虽然血浆和血清都可以使用FGF-23 ELISA试剂盒进行检测,但建议使用血清。
3)试剂盒是否可以测试动物样本?
FGF-23ELISA试剂盒可用于测量小鼠,大鼠或猴血FGF-23水平。
4)试剂盒是否含有任何汞基防腐剂?
FGF-23 ELISA试剂盒不使用水银防腐剂,如硫柳汞。标准溶液,稀释溶液,酶标抗体溶液和浓缩洗涤溶液使用Kathon TM CG作为防腐剂。
5)操作预防措施
校准曲线必须为每次测试准备。
如果测试多个样品,则反应时间必须保持一致。
搅拌板时必须进行一级反应。搅拌前应密封盘子。
洗涤周期中必须遵守以下预防措施:
不要将洗版溶液留在其中。
一旦从井中充分移除洗涤液,立即进入下一步。
试剂使用方法:
1)在支架上准备足够数量的抗体涂层带。
2)向孔中加入50μL检测稀释剂。
3)向每个孔中加入50μLFGF-23标准品或样品,并用平板密封器盖住平板。
4)在板式混合器上在室温下孵育平板2小时。
5)拆卸封板器。吸取每孔中的样品。用300μL工作洗涤缓冲液洗涤每个孔4次,并w全吸出内容物。
6)向每个孔中加入100μL的FGF-23结合物并用封板器覆盖该板。
7)在平板混合器上在室温下孵育平板1小时。
8)拆卸封板器。吸取每孔中的样品。每孔用300μL工作洗涤缓冲液洗涤4次,并将其w全吸出。
9)向每个孔中加入100μL底物,并用平板封口机和铝箔覆盖平板。
10)在室温下孵育板30分钟。
11)去除封口机和铝箔。立即加入100μL终止液到每个孔。在平板混合器上摇动板1分钟。
12)用微量滴定板读数器在10分钟内读取450nm处的吸光度。