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细胞“罢工”?!细胞传代后增殖缓慢之谜!

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2024/11/25 14:47:41

培养箱里,我们的“小劳模”细胞们每天忙着分裂增殖,为我们的实验贡献着力量。然而,有时候,这些小家伙们却会突然“罢工”,传代后的增殖速度变得慢如蜗牛,仿佛一夜之间爱上了慢生活。这背后究竟是什么原因呢怎样才能让细胞们恢复干劲呢? 请看下文:

接种密度低

你知道吗?很多细胞都有密度依赖细胞自身会分泌一些因子到培养基中促进周围的细胞生长(旁分泌)。细胞密度太低,这种化学信号的传递减弱,细胞状态受到影响接种密度越低,增殖越慢,甚至不增殖。

细胞“罢工”?!细胞传代后增殖缓慢之谜!

解决方案:根据细胞生长速度确定合适的传代比例和接种密度。如果细胞已经传稀了,可以耐心继续培养,或将细胞重新传到更小的器皿中,增加密度。特别提醒!T25培养瓶底面积为25cm2,10cm培养皿底面积是55cm2,所以一个T25传10cm皿约等于1:4传代,而不是1:2


培养基、血清不合适

想象一下,你突然到一个全新的城市上学上班,面对全新的环境,是不是也需要适应一段时间呢?细胞突然被换到新的培养基和血清中,也会出现水土不服的情况,特别是对血清要求高的细胞新的培养基或血清不对细胞胃口时,导致它们食欲不振,生长速度自然就慢了下来。

细胞“罢工”?!细胞传代后增殖缓慢之谜!

解决方案

检查新培养基和原培养基的配方是否有差异,是否需要额外添加试剂,成分尽量保持一致。新培养基和原培养基混合培养1-2代,让细胞慢慢适应,如果细胞正常生长,再完quan替换为新的培养基。如果它们实在适应不了新培养基还是换回原培养基,毕竟实验不等人啊!另外,记得定期换液别等培养基都变成金黄色了才换,这无异于把细胞活活饿死!



细胞受损

在细胞传代的过程中,如果发生一些“工伤”事故比如胰酶消化时间过长,导致它们受伤;消化时间过短,细胞们还没完quan分开,就被强行“搬家”了,导致细胞膜受损;重悬时疯kuang吹打,生怕吹不均匀,结果把细胞打得半死不活,都会导致细胞增殖速度变慢。

细胞“罢工”?!细胞传代后增殖缓慢之谜!

解决方案:

传代时严格控制胰酶消化时间,控制吹打次数和力道。如果细胞已经受损了,传代后漂浮细胞和碎片很多,可以尝试提高血清浓度(总量不超过20%)帮助它们恢复元气。如果伤情严重,抢救失败,那还是重新复苏吧!

细胞衰老

原代细胞以及一些有限传代的细胞系,随着传代次数增多,细胞生长速度逐渐减慢,最终停止增殖。

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解决方案:

细胞衰老是自然法则无法避免,我们可以通过优化培养条件和操作,让细胞尽可能保持好的状态,并及时进行实验对于有限细胞系,要记得冻存早期代次作为备份。对于原代细胞,则要规范提取步骤,保证细胞质量稳定,实验重复性才能更好。

虽然细胞不增殖的时候我们心急如焚,但也让我们更加深入了解自己细胞的特性。通过不断探索和实践,我们找到了z适合的培养方案,细胞们会更加健康、快乐地生长着。祝各位同学和自己的细胞们相处愉快!



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