(1)开机之前液体样品和试剂、枪头、96孔板的放置。一般A1放置枪头(带枪头盒),规格50µl,一次可放96个。A2位置放置试剂槽(Reservoir Rack一次最多可放7个试剂槽)。B1位置放置Rack,Rack上小孔,最多可直接放置24个1.5ml或2ml离心管(管中放置样品或试剂);Rack配置12个适配器,可放置200的PCR管(适合少量样品和试剂的转移)。B2位置放置96孔PCR反应板(带96孔板适配器)。
(2)连接仪器电源,打开仪器电源开关。
(3)大约5分钟后,显示器直接显示仪器控制软件界面。
(4)软件主界面介绍:File/Exit to Start Screen打开控制软件所显示的起始界面;File/Show Keyboard显示电子键盘,保存文件给文件命名时,输入数字或字母均需要打开电子键盘;File/Show Keyboard Automatically选中该项,在需要输入字母或数字时自动显示电子键盘;File/Sound Enabled关闭声音;File/Shutdown关闭仪器控制软件,点击该项关闭过程结束时,显示器黑屏。
(5)Help/5《HeIpYDeviceManuaIsepMotion5070,eIp/Software《/epmotion507仪器硬件介绍及其使用。Help/Software Manuals Information仪器生产许可证信息。Help/About epBlue epBlue总体信息。Help/Open Source Licenses打开源许可证协议
(6)点击“Application Runner”图标,查看已编辑程序的大概信息,出现“Application Runner"界面。(a)点击“Eppendorf"图标,界面中间出现控制软件的名称。适合控制本机软件的名称为“Fil384_5070”和“Fill96_5070”两个。双击两个文件,出现“Available devices”和“Workable”信息。可显示仪器编号、使用移液枪的类型、操作面板排布等信息。(b)点击“Home”图标,出现用户编辑和已使用过的程序信息。双击程序名称,可查看程序可控制硬件的大概信息。
(7)点击软件起始的主界面“Application Editor”图标,出现“Application Editor”,选中“Home”图标,双击界面中间程序名称,可编辑或运行已存在的程序。
(8)点击“New Application”图标,编写新的运行程序,出现“Create new application”界面,在Name框中填写程序名称,点击“OK”。
(9)界面顶端中部出现“Home/程序名称 -Applicatio Editor”,即可开始编辑运行程序。
(10)编辑工作界面“Worktable”。该仪器没有配置Park1、Park2、Park3区域,因此不用对其进行设置。T1/T2为放置单通道和8通道移液枪,仪器自动进行识别。 Waster为废枪头收集区域。A1/A2/B1/B2为需要编辑区域,主要设置PCR板、样品、试剂放置的位置。
(11)A1位置通常放置枪头(带枪头盒)。设置方法:“Workable”界面下选中左侧“Tips”,在Labware界面选择“tips”类型。例如枪头的类型为50µl规格(不带过滤膜),选择tip50:dws/tips/tip50,按下鼠标左键不放,直接拖到A1位置后松开鼠标,即可将A1设置为放50µl枪头位置,点击OK”。
(12)A2位置通常放置 Reservoir Racks with Moduless该模块上可放置7个30ml试剂槽,后续操作步骤同A1。
(13)B1位置放置 Rack with tubes(管中可放置样品或试剂)。设置方法:在界面左侧 Labware category里面双击 Racks with Tubes在 labware里面出现各种规格的 Racks。本仪器配置的Racks为 Rack.5+Adaptor/1.5/2.0ml。在 Labware里面用鼠标选中“Rack0_5ml,dws/trth/rack0_5m不放,直接将该图标拖至B1位置后松开鼠标。
(14)B2位置通常放置96孔反应板(置A2的试剂盒B1样品分别转移至96孔反应板的各个小孔中)。设置方法:在界面左侧 Labware category中双击 Thermoblocks with Plates labware界面出现各种规格的 Thermoblocks with Plates。本仪器直接选中“EP_Tube_Thermo_0_2mldws/thermopl/EP_Tube_Thermo_0_2ml按下鼠标左键不放,直接拖至B2位置再松开鼠标,出现对话框点击“OK”即可。
(15)在界面Workable下面用鼠标点击“Switch to procedure”,界面切换到“命令设置”界面。(a)Liquid Transfer液体转移,有6种类型:①Number of Samples样品数量;②Sample Transfer样品转移;③Reagent Transfer试剂转移;④Dilutes稀释;⑤Pool试剂或样品混合;⑥Pool one destination多种样品或试剂混合在一起。(b)Process样品转移到目标孔后常见处理类型:①Mix样品试剂转移到小孔后进行混匀;②Pierce枪头顶端移至液面以下加样;③Wait等待,可设置等待的时间。