干热灭菌生物指示剂采用特定菌种：干热灭菌生物指示剂通常选用枯草杆菌黑色变种芽孢（Bacillus atrophaeus ATCC 9372），该菌种具有较强的耐热性，能够在干热条件下存活一定时间，对干热灭菌过程有较好的指示作用。
芽孢的存活与灭活：在干热灭菌过程中，如果灭菌处理不完quan，芽孢能够在高温环境下存活下来。而当灭菌条件达到要求，足以杀死所有微生物时，芽孢则会被全部灭活
培养与颜色变化：灭菌完成后，将生物指示剂中的菌体芽孢放入含有 pH 指示药的培养液中，在 30℃-37℃的温度下进行培养。如果灭菌不彻di，残存的芽孢会在培养液中遇到适宜的条件开始繁殖，并代谢产生酸性物质，导致培养液的 pH 值降低，从而使培养液颜色发生变化，如由红色变成黄色 。反之，如果灭菌完quan，芽孢全部死灭，培养液中无芽孢繁殖代谢，颜色则保持红色不变。
对照管的设置：为了确保结果的准确性，每次检测时都会使用同一批号未灭菌的菌片放入培养基中作为对照管，与灭菌后的菌片同时进行培养。只有当对照管的培养液颜色由红色变成黄色呈阳性，而灭菌后的菌片培养液颜色保持红色不变时，此次生物学检测结果才算有效，才能判定灭菌是完quan的。
