摘要本应用简报介绍了一种利用 Agilent 6470B三重四极杆 LC/MS系统检测食品基质中244 种农药残留的 LC/MS/MS 筛查方法。有机橙子和红茶由于所含成分复杂，因此被选择用于评估该方法检测食品基质中农药残留的性能。在橙子基质中，除一种目标农药外，其余所有目标农药均可在小于或等于欧盟委员会规定的默认最大残留量 (MRL) 10 µg/kg 的水平被检出[1]。在浓红茶基质中，239 种农药可在小于或等于10 µg/kg 的浓度被检出。研究人员还研究了基质效应对分析物响应的影响，结果表明，橙子基质和红茶基质中分别有 50% 和 40% 的农药可在 SANTE 指导原则要求的范围内 (80%–120%) 得到回收[2]。这些结果证明，6470B三重四极杆 LC/MS 可满足高灵敏度要求，能够对食品基质中的农药进行准确、精密地定量分析。
前言农药对于保护农作物起着作用，在大多数农产品的生长环境中，为实现高产量，往往需要使用农药。因此，我们十分关心所购买的农产品中是否存在农药及其含量。在如今各类有机产品和无机产品琳琅满目的市场上，这一点尤其值得关注，因为食品真伪或食品污染会影响有机食品的质量。监管机构（例如，美国环保局 (US-EPA)[1,3] 和欧盟委员会[4]）制定了相应的法规来限制农药的使用以及允许量，从而保证消费者购买到安全的食品。最大残留 (MRL) 是指正确使用农药时（良好的农业生产方式），食品或饲料内部或表面所含法律容许农药残留的水平。在食品中，典型的 MRL 约为µg/kg 级（十亿分之一 (ppb)），因此需要使用非常灵敏的仪器来检测化合物。对于红茶等含有多种内源性组分的食品尤其如此，因为这些内源性组分会造成严重基质效应。
本应用简报介绍了一种 LC/MS/MS 筛查方法，该方法可对复杂多样的食品基质中所含的 244 种农药进行检测和定量。将安捷伦农药全套测试混标分别加入有机红茶提取物和全橙提取物中。提取物按照下文所述的 Agilent QuEChERS 萃取和 EN 分散 SPE 方案制备。将 Agilent1290 Infinity II 液相色谱与 6470B 三重四极杆 LC/MS 联用，以动态多反应监测(dMRM) 方法分析样品。6470B 三重四极杆 LC/MS 进行了多方面的硬件改进，例如采用 VacShield 技术，离子源无需放空即可维护，有利于延长仪器正常运行时间；采用更快速的电子器件，具有改善的稳定时间参数，能够在极低的驻留时间下保证色谱峰重现性。
实验部分试剂与标准品本研究使用了安捷伦农药全套测试混标（部件号 5190-0551）。将农药全套测试混标的八种子混合物进行混合，然后用乙腈 (ACN) 稀释得到最终农药工作溶液，该溶液浓度为 10 µg/g。将该溶液加入 QuEChERS 提取物中用于制备校准样品。为确定样品基质中的方法检测限(MDL) 和定量下限 (LLOQ)，使用红茶和有机橙样品提取物分别制备了 7 个浓度在0.5–100 ppb 之间的校准样品。所有试剂和溶剂均为 HPLC 或 LC/MS 级。乙腈和甲醇购自 Honeywell (Morristown,NJ, USA)。超纯水产自配备 LC-Pak Polisher和 0.22 µm 膜式终端过滤器滤芯的 Milli-QIntegral 系统 (EMD Millipore, Billerica, MA,USA)。甲酸和甲酸铵购自 Fluka（SigmaAldrich 公司，St. Louis, MO, USA）。样品前处理有机散叶红茶和有机橙购自当地杂货店。用 8 mL 水将 2 g 茶叶样品润湿，并使样品在室温下温育 2 小时。利用陶瓷均质子（部件号 5982-9312）制出充分混合的均匀橙子样品，并称取 10 g 样品用于提取。用 10 mL 乙腈通过剧烈振摇对 2 g 固体茶样品和 10 g 固体橙子样品萃取 1 分钟。分别向各混合物中加入一袋安捷伦 EN 方法萃取盐（部件号 5982-6650），振摇 1 分钟，然后在 3000 ×g 下离心 5 分钟。将6 mL 茶叶上清液加入用于高色素 EN 方法的 Agilent QuEChERS 分散 SPE 管（部件号 5982-5356）中。同样，将 6 mL 橙子上清液加入用于含色素的水果和蔬菜 EN的 Agilent QuEChERS 分散 SPE 管（部件号 5982-5256）中。将两者振摇 1 分钟，然后在 3000 ×g 下离心 5 分钟。收集所得上清液，并通过 0.45 µm 针头过滤器过滤。将之前制备的农药工作溶液以相对原固体食物基质干重 100 ng/g (ppb)的浓度加入红茶和橙子提取物中。用适当的基质进一步稀释样品，获得 0.5、1、5、10、20、50 和 100 ppb 七个浓度水平的农药校准样品，需在进样前立即制备，每个浓度重复进样六次。将农药也加入纯乙腈中，比较 10 ng/g 浓度下两种基质的信号回收率。
