α-Amylase Assay Kit (Ceralpha Method)
α-淀粉酶测定试剂盒
货号：K-CERA
规格：100 assays per kit
作品简介:
微生物α-淀粉酶在谷物制品淀粉改性和谷物加工中有着广泛的应用。谷物及其制品中内源性α-淀粉酶的水平对这些商品的工业化开发具有重要影响。在制作面包时，α-淀粉酶的含量必须足以产生可被酵母吸收和利用的糖类，但又不能高到导致淀粉过度糊化，从而导致面包屑粘稠和加工过程中的问题。在酿酒行业，麦芽α-淀粉酶水平是麦芽品质的重要指标。α-淀粉酶还可作为青贮饲料添加剂，帮助淀粉降解，从而为细菌生长提供可发酵糖。细菌、真菌和谷物α-淀粉酶都可以用淀粉酶HR试剂测定，但需要修改测定条件（特别是pH）以适应每种特定的酶。淀粉酶HR试剂是α-淀粉酶特异性试剂。该底物对β-淀粉酶、淀粉葡糖苷酶和α-葡糖苷酶等外泌酶具有绝对的抗性。
原则:
用于α-淀粉酶测定的Ceralpha程序（使用淀粉酶HR试剂）采用定义的低聚糖“非还原端阻断对硝基苯基麦芽糖苷”（BPNPG7）作为底物，存在过量的耐热性α-葡萄糖苷酶（由于“阻断基团”的存在，它对天然底物没有作用）。在内作用α-淀粉酶水解低聚糖时，混合物中过量的α-葡萄糖苷酶使对硝基苯麦芽糖片段瞬间定量水解为葡萄糖和游离对硝基酚。
从本质上讲，在规定的条件下，将谷物面粉提取物或发酵液的等分物与底物混合物孵育，并通过添加弱碱性溶液终止反应（并产生颜色）。测量400 nm处的吸光度（先前的吸光度值是在410 nm处测量的，与文献值一致，但真正的吸收峰是在400 nm处），这与分析样品中α-淀粉酶的水平直接相关。
淀粉酶HR混合试剂可用于谷物、真菌和细菌α-淀粉酶的定量测定。随着耐热性α-葡萄糖苷酶取代淀粉葡萄糖苷酶和酵母α-葡萄糖苷酶（如存在于原始Ceralpha试剂混合物中），该检测现在可以在更宽的pH范围（5.2至7.0）和高达60°C的温度下使用。使用该试剂，谷物α-淀粉酶活性的最佳pH值为5.2-5.4。在此pH范围内，淀粉酶HR试剂对谷物α-淀粉酶的活性值与含淀粉葡萄糖苷酶和α-葡萄糖苷酶的Ceralpha试剂在pH 5.2下的活性值基本相同。以阻断对硝基苯基麦芽糖苷为底物的试剂混合物不能区分真菌、谷物和细菌α-淀粉酶。
准确性:
标准误差通常小于5%。
KITS:
Kits suitable for performing 100 assays are available from Megazyme and consist of:
1. Full assay method
2. Freeze dried BPNPG7 plus thermostable α-glucosidase
3. Concentrated Extraction Buffer
4. Concentrated Stopping Reagent
5. Control Malt Flour
特异性:
该试验对α-淀粉酶具有绝对特异性。
