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2024/12/12 10:16:14Takara RR820A对应的产品名称为:TB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus),是采用 TB Green 嵌合荧光法进行 Real Time PCR 的专用试剂。Takara RR820A是一种高特异性qPCR试剂,让我们一起来看看它的原理吧!
Takara RR820A使用了改良后的 TaKaRa Ex Taq HS 进行 PCR 扩增,通过检测反应液中 TB Green 的荧光强度,达到监控 PCR 产物扩增量的目的。
1. PCR
PCR 法是以微量 DNA 进行目的片段扩增的方法。通过 DNA 链的热变性、引物退火、DNA 聚合酶作用下引物的延伸三个步骤循环往复,可在短时间内扩增 DNA 达100万倍以上。本产品中的 DNA 聚合酶由于使用了 TaKaRa Ex Taq HS,从而抑制在调制反应液等低温条件下由引物产生的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增,大大提高 PCR 扩增灵敏度。
2. 嵌合荧光检测法
TB Green 与双链 DNA 结合后发出荧光,所以可以通过检测反应体系中的 TB Green 荧光强度,达到检测 PCR 产物扩增量的目的。具体原理见下图。通过 PCR 反应生成双链 DNA,TB Green 与双链 DNA 结合发出荧光,通过检测 PCR 反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确定量,同时还可以测定扩增的目的 DNA 片 段的融解温度。
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