支原体污染是细胞培养中常见的问题，尤其是在生物医学研究和制药工业中。支原体是一种细菌，属于微生物中的小型细菌，通常比细胞培养的真核细胞要小很多，且没有细胞壁，生长依赖于寄主细胞，因而难以被检测和去除。
支原体污染细胞的影响：
1.细胞生长和代谢：支原体会消耗细胞培养基中的养分，影响细胞的生长速度和形态，导致细胞生长迟缓或停止。
2.基因表达：支原体的存在可能会干扰细胞的基因表达，导致基因表达谱的变化，从而影响实验结果的可靠性。
3.细胞功能：支原体会影响细胞的正常功能，可能造成细胞凋亡或其他负面影响，特别是在免疫细胞、神经细胞等特殊细胞类型中更为明显。
4.实验结果的误差：由于细胞特性被改变，支原体污染会导致实验数据的不一致性，从而影响研究的结论。
检测方法：
1.显微镜检查：通过光学显微镜直接观察细胞培养中的支原体结晶或异物。
2.培养法：将细胞培养液稀释后接种于特定的培养基中，观察是否有支原体生长。
3.PCR技术：利用聚合酶链反应（PCR）技术检测细胞培养中支原体的特定核酸序列，灵敏度高且特异性强。
4.ELISA检测：使用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测支原体抗原或相关抗体。
5.荧光染色：一些特定染料可以标记支原体，从而通过荧光显微镜观察。
支原体预防污染的措施：
1.良好的操作规范：实验室应遵循严格的无菌操作规程，减少交叉污染的风险。
2.高质量试剂：使用经过认证的、无支原体的培养基和试剂，定期检查和更换培养基。
3.设备清洁：定期对实验室设备进行清洁和消毒，尤其是培养箱、移液器等。
4.个人防护：实验室人员应佩戴手套、口罩和实验服，减少对细胞培养的直接接触。
5.环境监测：定期监测实验室空气质量，使用空气过滤系统以减少空气中微生物的浓度。
