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Hamilton MagPip技术实现小体积反应的高速度高质量自动化移液

哈美顿(上海)实验器材有限公司 >> 进入商铺

2024/12/19 13:05:23

MagPip移液通道是Hamilton公司推出的一种创新性的移液技术。简而言之,移液通道的柱塞不再由任何机械连接(如主轴或皮带)驱动而由线圈驱动。此技术设计可以使活塞拥有巨大的速度和加速度。这将因此可以使用一种称为WhiPip分液的新型分液模式来无接触地分装小体积液体。使用WhiPip分液,移液非常精确,可降到350nL的量,且体积每孔均可自由调节。更小的体积意味着你可以节约使用珍贵的样品和试剂。此外,WhiPip分液模式可以优化和简化工作流程,减少吸头消耗。同时,该移液通道具有非常广泛的移液量程(350nl-750ul),从而可以很大程度提升相关实验的吸放液设计,提高工作效率。   

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在本应用中,通过 TaqMan™ qPCR构建展示了MagPip的优势。与常规移液平台相比,MagPip通道低容量移液使总PCR体积减少50%成为可能。尽管移取体积降至0.3µL,但qPCR分析结果显示具有非常高的精密度和可靠性。

体积更小:小体积用量节省贵重样品和试剂

移液步骤更少:简化移液工作流程

更少的吸头消耗:WhiPip技术允许小体积分装,不接触试剂

高质量:精确的移液可获得高质量的结果

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工作流程

为了确认MagPip技术的精密度,我们使用配备8x MagPip通道的STAR V对15份生物样本和1份水对照品进行TaqMan™qPCR。通过分析3个差异表达基因揭示采用WhiPip分液技术的移液精密度。

使用WhiPip分配模式,我们能够移取三种不同基因的TaqMan™ qPCR反应,而不制备主混合物。将MagPip的移液程序与标准通道进行比较,可以清楚地看到工作流程的改进。

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MagPip无需使用主混合物,减少了移液步骤、移液时间和死体积。概述见表1。

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在移液方案的第一步中,使用带有WhiPip多次分配喷射模式的单个300µL吸头将2.1µL ddH2O分配到384孔板的240个目标孔中。因此,一次就可以移取135个单独的样本分装。采用相同的移液程序,仅使用一个300µL吸头可以将3µL 2x Applied Biosystems™TaqMan™基因表达主混合物分配至240个目标孔中。此后,将用于分析三种不同基因的0.3µL TaqMan™探针移液至80个目标孔中,使用10µL吸头以获得更好的移液精密度。每个探针只需要1个吸头。移液也是在WhiPip多点喷射模式下进行的。最后,将来自15个生物样品的0.6µL cDNA[浓度10 ng/µL], (cDNA由C57BL/6小鼠大脑分离的RNA产生)和一个水对照物用WhiPip多分配模式移液至15个孔中。每孔各一个。这允许每个样本使用一个吸头进行所有15次重复。移液布局如图所示。

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结果

为了确认MagPip技术的精确度,对15个生物样本的3个差异表达基因的基因表达进行了一式五份的评估。因此,在Novartis Pharma AG使用ThermoFisher QuantStudio 7Pro实时PCR系统分析上述TaqMan™qPCR反应混合物。使用QuantStudio Design & Analysis 2.6软件进行结果分析。

通过MagPip技术,我们能够非常精确地移取不同的样本组,也采用了低体积试剂方法。一式五份CT值的标准差范围为SD±0.11至SD±0.43。在生物医学研究所对这些样本集进行移液和分析,发现SD值在相同范围内。此外,不同一式五份样品的变异系数 (CV) 在0.44%和2.24%之间,平均值的CV=0.98%。

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