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2024/12/23 15:32:58关节炎模型制备
背景简介:
关节炎与人类风湿病关节炎具有共同的免疫学和病理学特征,因此CIA模型被广泛应用于研究致病机理及治疗方法的研究。胶原诱导关节炎(CIA)是用Ⅱ型胶原免疫Wistar(远亲杂交)、Sprague-Dawley (远亲杂交)和Wistar-Lewis (近交) 中诱导成功。由于此CIA模型具有与人风湿病关节炎(RA)相同的免疫和病理特征,因此该模型先后扩展到小鼠及非人灵长类动物,并已作为人类关节炎研究的广泛应用的模型。然而,对于CIA模型来说,不同种属动物之间是有差异的。小鼠对CIA的敏感性与主要组织相容性复合体(MHC)相关,在小鼠品系中只有DBA/1(H-2q)和B10.RⅢ(H-2r)两个品系对CIA敏感。大鼠对CIA的敏感性也与MHC相关,并与小鼠相比具有较宽的品系范围。因此,不同MHC型的不同品系的大鼠,尽管关节炎的发病率、严重程度及抗体和T-cell 的特异性在不同品系间不同,但都能够诱发关节炎。
操作流程:
1)小鼠CIA模型(胶原诱导的关节炎)
初次免疫:II型胶原&CFA佐剂CFA(佐剂浓度依小鼠品系而定)配成的乳剂尾根部皮下100ul。
加强免疫:7天或21天后,II型胶原& IFA佐剂IFA配成的乳剂尾根部皮下100ul。 4周左右发病,6-8周发病率达到高峰
2)大鼠CIA模型(胶原诱导的关节炎)
初次免疫:II型胶原&IFA佐剂IFA配成的乳剂配成的乳剂尾根部皮下200ul。
加强免疫:7天或21天后,II型胶原& IFA佐剂IFA配成的乳剂尾根部皮下100ul。
2-3周左右发病,3周后发病率达到高峰。
2) 小鼠CAIA模型(胶原抗体诱导的关节炎)
方案A: 易感品系:DBA/1, Balb/c
0天:小鼠尾静脉或腹腔注射1.5mg 5克隆合剂。
3天:小鼠腹腔注射25-50ug LPS
方案B: 钝感品系:C57BL/6 or C57BL/6
0天:小鼠尾静脉或腹腔注射5mg 克隆合剂。
3天:小鼠腹腔注射25-50ug LPS
注意:3-4天可诱发关节炎,7-10天达高峰期。10-14天可免疫LPS 加重炎症反应程度。
方案C: DBA/1 and Balb/c mice(不加LPS)
0天:小鼠尾静脉或腹腔注射6-10mg
注意:2-3天可诱发关节炎
3)大鼠AIA 模型(佐剂诱导的关节炎)
尾根部皮下免疫0.05ml CFA佐剂(cat#7027 10 mg/ml)。这种方法的优点是能够使4只爪子都发生肿胀。
免疫后12-14天在爪子发生肿胀,关节炎会持续20-25天。
注:如果用(cat#7024 20 mg/ml)佐剂免疫,注射体积应降低一半。
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