96孔酶标仪是一种用于同时读取96孔微孔板中的各孔信号的设备。它广泛应用于生物医学研究、临床实验、药物筛选、环境监测等领域,尤其在酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质分析、细胞学研究等实验中扮演着至关重要的角色。
96孔酶标仪通过不同的测量模式(吸光度、荧光、发光等)提供多种检测方法,每种模式都有其特定的应用场景、优点以及适用范围。
一、化学发光(CL)模式
化学发光模式通过化学反应释放光信号,广泛应用于免疫分析、分子生物学研究等领域。与传统的荧光和吸光度模式不同,化学发光不需要外部激发光源。
原理与应用:
化学发光模式通过催化反应或生物化学反应产生光信号,这些反应的强度与目标物质的浓度成正比。
应用广泛,尤其在免疫学和分子诊断领域。
优点:
具有高灵敏度,尤其适用于低浓度分析。
不受光源干扰,能够提供更加准确的检测。
二、吸光度模式(OD模式)
吸光度模式通过测量样品在特定波长下的光吸收来判断样品的浓度或反应的程度。
原理与应用:
在吸光度测量中,酶标仪通过光源发射特定波长的光,光经过样品后被检测器接收并计算吸光度值。
该模式适用于需要量化物质浓度的实验,常见于酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质定量、细胞增殖分析等。
优点:
该模式具有较高的灵敏度,适合用于低浓度物质的检测。
对于ELISA等经典免疫学实验,吸光度模式能够提供精确的定量结果。
操作简便,广泛应用于科研和临床。
三、荧光模式
荧光模式是基于荧光发射原理进行测量的。在此模式下,激发光源通过激发样品中的荧光分子,荧光分子随后发射特定波长的荧光信号,酶标仪通过检测这些信号的强度来量化目标物质的浓度。
原理与应用:
荧光模式适用于标记荧光探针或荧光染料的分析。被标记的分子在受到特定激发光照射时,能够发射出特定波长的光。
广泛应用于细胞活性检测、基因表达分析、蛋白质相互作用研究等。
优点:
相比吸光度模式,荧光模式具有更高的灵敏度,可以检测到低浓度的目标物质。
适用于分子探针标记技术,能够提供更丰富的实验信息,如蛋白质表达水平、细胞内离子浓度等。
四、发光模式
发光模式通过测量样品中化学反应引发的光发射来进行定量分析。这种模式通常用于化学发光反应或生物发光反应,如常见的酶标记反应。
原理与应用:
发光模式不需要外部光源,而是依赖样品本身的发光反应。典型的应用是利用酶与底物反应释放光子,在某些生物标记反应中,目标分子的存在会导致发光反应发生。
应用于药物筛选、细胞活性检测、免疫分析等。
优点:
高灵敏度,可以检测到低浓度的样品。
不受样品颜色、浑浊度等因素的影响,背景干扰较少。
五、时间分辨荧光(TRF)模式
时间分辨荧光模式是在传统荧光检测基础上发展而来的,其通过延迟检测信号的时间来提高灵敏度和准确性。TRF模式可以减少背景荧光的干扰,提供更清晰的信号。
原理与应用:
在TRF模式下,激发荧光物质后,仪器会等待一段特定的时间,在此期间大部分背景信号会衰减,从而提高信号与噪声的比值。
适用于更高灵敏度的检测,如蛋白质标记、DNA/RNA探针标记等。
优点:
高灵敏度,尤其适用于低背景样品的检测。
背景干扰较少,信号清晰。
96孔酶标仪的多种测量模式使其成为多功能的分析工具,广泛应用于生物学、化学、医学等领域。