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2024/12/26 9:01:49前言
地肤子是藜科植物地肤的干燥成熟果实 ,具有清热利湿、抗炎、抗过敏、抗搔痒等功效,常用于治疗小便涩痛、风疹、湿疹、皮肤搔痒等症状。地肤子主要含三萜皂苷、生物碱、黄酮类等成分,其中三萜皂苷类成分主要为地肤子皂苷Ic。由于地肤子皂苷Ic在200nm左右有末端吸收,使用常规的紫外检测器进行检测时,往往基线噪音大,灵敏度较低。建议使用蒸发光散射检测器(ELSD)对地肤子中地肤子皂苷Ic进行检测。
本篇文章参考了《中国药典》中地肤子的含量测定项下高效液相色谱法色谱条件,采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置蒸发光散射检测器对地肤子样品中地肤子皂苷Ic进行检测。实验结果显示,地肤子皂苷Ic对照溶液(500μg/mL)分别进样10μL、20μL,地肤子皂苷Ic色谱峰的理论塔板数均高于3000,满足实验分析需求。标曲实验采用外标两点法对数方程计算,地肤子皂苷Ic标准曲线线性范围较好,线性相关系数>0.999,满足实验分析需求。地肤子皂苷Ic溶液(500μg/mL,10μL)重复进样5次,保留时间RSD值为0.265%,峰面积RSD值为0.564%。地肤子皂苷Ic溶液(500μg/mL,20μL)重复进样5次,保留时间RSD值为0.088%,峰面积RSD值为0.403%,重复性较好。取地肤子作为测试样品,根据地肤子皂苷Ic标准品色谱峰保留时间进行定性,对地肤子样品中地肤子皂苷Ic进行检测。结果显示,地肤子药材中含地肤子皂苷Ic 3.5 %,满足标准要求。说明该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足对地肤子药材中地肤子皂苷Ic的检测需求。
关键词:地肤子皂苷Ic;高效液相色谱法;蒸发光散射检测器;地肤子。
1 实验方法
1.1 仪器配置
1.3测试条件
1.4溶液配制和测定方法
地肤子皂苷Ic对照溶液(500μg/mL)
取地肤子皂苷Ic对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含0.5mg的溶液,即得。
2 结果与讨论
2.1 系统适用性
说明:由上述谱图可见,地肤子皂苷Ic对照溶液(500μg/mL)分别进样10μL、20μL,地肤子皂苷Ic色谱峰的理论塔板数均高于3000,满足实验分析需求。
2.2 标准曲线
说明:在使用蒸发光散射检测器时,由于散射光的信号为非线性的,根据ELSD的工作原理,进样质量(μg)和ELSD检测器的响应值(峰面积A)一般不呈现良好的线性。因为信号的响应值与物质质量的对数呈线性关系,如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后,两者呈现良好的线性关系,但是它是一条不经过原点的直线,所以在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)进行药物含量测定时必须使用外标两点法对数方程计算。本次测试分别精密吸取地肤子皂苷Ic对照溶液(500μg/mL)10μL、20μL,注入液相色谱仪,测定。地肤子皂苷Ic标准曲线线性范围较好,线性相关系数>0.999,满足实验分析需求。
2.3 重复性
2.4 样品测试
说明:根据地肤子皂苷Ic标准品色谱峰的保留时间进行定性,对地肤子样品中地肤子皂苷Ic进行检测。结果显示,地肤子含地肤子皂苷Ic 3.5 %,满足标准中大于1.8 %的要求。
2.5 注意事项
(1) 地肤子皂苷Ic对照溶液需避光保存。
(2) 在制备相关溶液时需要注意佩戴好实验室防护用品。
3 结论
本篇文章参考了最新版《中国药典》中地肤子的含量测定项下高效液相色谱法色谱条件,采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置蒸发光散射检测器对地肤子样品中地肤子皂苷Ic进行检测。实验结果显示,地肤子皂苷Ic对照溶液(500μg/mL)分别进样10μL、20μL,地肤子皂苷Ic色谱峰的理论塔板数均高于3000,满足实验分析需求。标曲实验采用外标两点法对数方程计算,地肤子皂苷Ic标准曲线线性范围较好,线性相关系数>0.999,满足实验分析需求。地肤子皂苷Ic溶液(500μg/mL,10μL)重复进样5次,保留时间RSD值为0.265%,峰面积RSD值为0.564%。地肤子皂苷Ic溶液(500μg/mL,20μL)重复进样5次,保留时间RSD值为0.088%,峰面积RSD值为0.403%,重复性较好。取地肤子作为测试样品,根据地肤子皂苷Ic标准品色谱峰保留时间进行定性,对地肤子样品中地肤子皂苷Ic进行检测。结果显示,地肤子药材中含地肤子皂苷Ic 3.5 %,满足标准要求。说明该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足对地肤子药材中地肤子皂苷Ic的检测需求。