摘要 本应用探讨了新电喷雾仪器与液相色谱/飞行时间质谱 (LC/ TOFMS) 和液相色谱/离子阱质谱 (LC/ITMS) 用于分析水果 (苹果,柠檬,瓜和桔子) 提取物和沙拉蔬菜 (西红柿,菜花和柿子 椒) 中的五种主要杀真菌剂的可能性。包括不同水果和蔬菜基 质中五种主要杀真菌剂（多菌灵、噻苯咪唑、氧化偶氮烯酰码啉、氟菌唑）的 LC/TOFMS 及 LC/ITMS MS/MS 谱 图，TOF 实验分子式，MS/MS 碎片及确认离子。给出了水果 及蔬菜中杀真菌剂的样品快速前处理及萃取方法的详细说明的 同时提供使用 TOF 和离子阱分析纯溶剂和水果及蔬菜提取物中 杀真菌剂的检出限 (LOD)、线性及定量的谱图。最后是市售的 实际样品水果及蔬菜：苹果，桔子，柠檬和瓜中杀真菌剂的分 析结果。
介绍 本文描述了鉴别和定量分析水果及蔬菜中杀真菌剂的 重要性 [1, 2]。欧盟指南中愈来愈多地使用 LC/MS 分析许多常见的杀真菌剂，很快成为了法规监测承认 的农药残留分析方法。LC/MS 尤其适用于极性和不 稳定的各种杀真菌剂的分析。因此，LC/MS 方法比 传统的 GC/MS 方法更加适合使用。比如，Pico 等人 对 MS 和 MS/MS 在食品中农药（包括杀真菌剂）分 析的应用进行了综述 [3]，目前有大致 100 篇文章涉 及食品中农药分析的内容，其中大约 25 篇左右是使 用 LC/MS 的，多数文章在 2000 年初发表。因此， LC/MS 是食品分析的新兴技术。然而，很有意思的 是，许多最近的文章中，没有一篇使用 LC/TOFMS 和精确质量数分析食品中杀真菌剂。 所以，开发研究 LC/TOFMS 方法，以精确质量数分 析食品中的农药显得十分重要 [1, 2]。我们目前的研 究报告是最先使用最新的安捷伦 LC/MSD TOF 分析 食品中杀真菌剂的方法之一。选择本主题的原因在于 这些杀真菌剂在苹果，桔子，柠檬，瓜，西红柿，菜 花和柿子椒中的大量使用。并且，LC/ITMS 也将作 为 LC/TOFMS 的比较方法用于分析水果及蔬菜中的 杀真菌剂。如何同时使用 LC/ITMS 方法细节也有描 述 [2]。
实验方法 水果和蔬菜的提取 (QuEChERS) QuEChERS 是一种提取方法的缩写，字母分别代表 快速，简便，经济，有效，持久和安全。该方法在食 品中农药分析的快速提取方面得到广泛的认可。是一 种提取方法的缩写，字母分别代表快速，简便，经济， 有效，持久和安全。该方法在食品中农药分析的快速 提取方面得到广泛的认可。 1. 称取 15 g 预先混匀的样品于 40 mL 特氟龙离心管 中。加入 15 mL 乙睛（含 1% 乙酸），6 g 无水硫 酸镁和 2.5 g 三水乙酸钠，用旋涡振荡器在最大速 度或手动振荡样品 1 min。然后，于 3700 rpm 离 心 3 min。 2. 取 5 mL 上层清液于 15-mL 试管中，加入 250 mg PSA 吸附剂及 750 mg 硫酸镁，旋涡振荡 20 s。 然后，于 3700 rpm 再次离心 3 min。将 1.0 mL 离心液转入自动进样瓶。然后将水果及蔬菜的提 取液残留物蒸发至干并用 8/92% 的甲醇/水溶解。
安捷伦 LC/MSD TOF 方法 • LC 泵为安捷伦 1100 二元泵，使用标准安捷伦 1100 自动进样器，进样体积 50 µL • 色谱柱：ZORBAX® Eclipse XDB-C8, 4.6 mm× 150 mm，5 µm, 部件号 993967-906 • 流动相 A：乙睛；流动相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A，25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷伦电喷雾源 - LC/MSD TOF • 正模式 ESI，毛细管电压 4000 V • 雾化器 40 psig，干燥气 9 L/min，气体温度 300 °C • 裂解电压 190 V，撇除器电压 60 V，八级杆直流 电压 37.5 V，八级杆 RF 电压 250 V • 参考质量：m/z 121.0509 和 922.0098,分辨率： 在 m/z 922.0098 处为 9500±500，分析时在喷雾 器 2 连续恒流使用参比 A
安捷伦 1100 系列 LC/MSD 离子阱方法 • 为便于直接比较色谱峰，使用与安捷伦 LC/MSD TOF 一致的色谱方法 • LC 泵为安捷伦 1100，进样体积 50 µL • 色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C8，4.6 mm× 150 mm，5 µm，部件号 993967-906 • 流动相 A：乙睛；流动相 B：0.1% 甲酸水溶液， 梯度：15% A 0-5 min，100% A 25 min， 0.6 mL/min 流速 • 安捷伦 1100 系列 LC/MSD 离子阱 • 正模式电喷雾离子源 (ESI) 毛细管电压 3200 V • 雾化器 40 psig,干燥气 9 L/min，气体温度 300 °C • 毛细管出口电压 70 V • 离子滞留，计数 50,000 次
结果与讨论 裂解及质量精度 图 3 显示了五种杀真菌剂的 LC 分离情况。样品含加 入柠檬提取物的 0.125 mg/kg (ppm) 杀真菌剂。图 3b 显示了各个化合物的提取离子色谱图。提取物窗 口很干净，说明提取离子的质量精度很高，提取离子 窗口宽度可窄至 (0.02 amu) 100 ppm。图 3 提取离 子的窗口为 0.1 amu。
当浓度低至 0.05 mg/kg 时，提取离子 (m/z 192， 202，346，388 和 404) 的色谱图仍然很干净，表明 精确质量数的重要性及其在很窄的窗口提供干净色谱 图的能力。在测定每个杀真菌剂的分子离子精确质量 时显示精确质量的窗口。表 1 显示了每个杀真菌剂在 0.50 mg/kg 浓度时的检测结果，包括元素组成，精 确质量及误差，分别以 mDa 和 ppm 表示。除烯酰 码啉外，在所有水果和蔬菜介质样品的分析中均获得 了高于 2 ppm 的质量精度。
