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pk401 - FD Rapid GolgiStain Kit产品介绍及使用说明

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2024/12/30 17:27:24



pk401 - FD Rapid GolgiStain Kit产品介绍及使用说明


Golgi-Cox染色法(高尔基染色法)是研究神经元树突和树突棘形态的zui有效技术之一,但存在可靠性和耗时的缺点。为了克服这些缺点,fdneurotech开发了FD Rapid GolgiStainTM Kit(快速高尔基染色试剂盒),该工具基于Ramo´n-Moliner和Glaser和Van der Loos的方法,显著改进并简化了Golgi-Cox技术。

通过使用FD Rapid GolgiStainTM Kit,可以在动物和死后的人类大脑中分析树突的形态参数,如树突长度、分支模式以及树突棘的数量、形状和大小。该工具的可靠性使得可以分析神经元的完整树突结构,从而可以研究特定神经元亚型中正常和异常的神经元树突形态。

FD Rapid GolgiStainTM试剂盒是一种用于神经组织学研究的染色试剂盒,它能够清晰揭示神经元的精细形态结构,包括胞体、轴突、树突及树突棘等,是定性定量分析神经元形态的重要工具。它通过改进传统染色技术,提供了一种更为简便、可靠的方法来研究神经元和胶质细胞的形态。FD Rapid GolgiStainTM试剂盒有以下特点:

改进的Golgi-Cox技术:该试剂盒基于Ramon-Moliner, Glaser和Van der Loos所阐述的方法原理设计,极大地改进并简化了传统的Golgi-Cox染色技术。

高灵敏度和可靠性:FD Rapid GolgiStainTM试剂盒被证实在显示神经元和胶质细胞,尤其是树突棘的形态细节上极为灵敏可靠。

广泛的应用:该试剂盒已被广泛用于多种动物脑组织染色,包括小鼠、大鼠以及其他动物的脑组织。

试剂盒组分:包括Solution A、B、C、D、E,琉璃样品回收器、天然毛画笔、滴瓶和用户手册。具体容量根据试剂盒的大小(Large Kits和Small Kits)有所不同。

操作简便:与传统的Golgi-Cox染色法相比,FD Rapid GolgiStainTM试剂盒简化了操作步骤,减少了操作时间。


在使用FD Rapid GolgiStainTM试剂盒前的准备工作

、准备试剂和材料:

确保拥有试剂盒中包含的所有溶液(溶液A、B、C、D、E)以及以下未包含在试剂盒中的物品:

双蒸水或Milli-Q水、塑料或玻璃管或瓶、组织学耗材,包括明胶包被的显微镜载玻片(Cat.#PO101)、盖玻片、染色罐、乙醇、二甲苯、树胶封片剂Permount®、光学显微镜

容器准备:所用容器(最好为塑料材质)必须用蒸馏水冲洗干净。

避免金属器具:当溶液A和溶液B存在时不能使用金属器具。

保持容器密封:用溶液A和溶液B处理的组织和切片,应该避光。

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、组织处理:

在杀死动物之前对实验动物进行深度麻醉,并尽快地从颅骨中取出动物的脑,操作时必须非常小心以免损伤或压迫组织。

用双蒸水或Milli-Q水快速冲掉组织表面的血液。

把组织浸泡在由溶液A和B等体积混合的浸渍液中,室温下黑暗保存两周。浸泡6个小时以后或次日更换新的浸渍液。

转移组织到溶液C中室温黑暗至少72小时(可长达1周)。24小时后或次日至少更换一次溶液。


、切片制备:

在-20℃到-22℃的条件下用冷冻切片机将组织切成100-200um厚的薄片。

用样本回收器把样本转移到含有溶液C的明胶包被的显微镜载玻片上。载玻片上多余的溶液用吸管吸走并用滤纸吸干。

切片可以室温下自然风干,不能用电风扇或电热板使其干燥。

安全操作注意事项:在化学通风橱下完成实验,并穿戴合适的防护服、手套和眼睛及面部防护罩。


使用FD Rapid GolgiStainTM试剂盒时的注意事项

专用性:FD Rapid GolgiStainTM Kit仅用于体外研究,不能用于诊断或其他应用。

毒性警告:试剂盒所包含的试剂是有毒的,吸入或接触皮肤是有害的,如果吞咽可能是致命的。不要用嘴吸。避免吸入和接触皮肤和眼睛。如果接触,立即用大量的水冲洗并求助医生。

实验环境:在化学通风橱下完成实验。操作这些试剂时须穿戴合适的防护服,手套和眼睛及面部防护罩,完成实验之后把手冲洗干净。

容器要求:所用容器(最好为塑料材质)必须用蒸馏水冲洗干净。当溶液A和溶液B存在时不能使用金属器具。

避光处理:用溶液A和溶液B处理的组织和切片,应该避光。

溶液制备:溶液A和溶液B的混合液至少在用之前24小时配制,并不能搅拌。制备好的浸泡液在用之前室温黑暗保存可长达一个月。

组织处理:杀死动物之前对实验动物进行深度麻醉。应尽快地从颅骨中取出动物的脑,但操作时必须非常小心以免损伤或压迫组织。

切片处理:用样本回收器把样本转移到含有溶液C的明胶包被的显微镜载玻片上。载玻片上多余的溶液用吸管吸走并用滤纸吸干。切片可以室温下自然风干,不能用电风扇或电热板使其干燥。

染色步骤:在染色过程中和盖盖玻片之前的任何一步都不要让切片变干。

废弃物处理:不要把溶液A和B的废弃物倒进水槽中,应收集起来放到一个瓶子中,联系安全办公室或有执照的专业废物处理服务部门处理这些材料。

遵循这些注意事项可以确保实验的安全和有效性。


判断FD Rapid GolgiStainTM试剂盒染色后神经突触的染色效果

染色深度和清晰度:染色效果良好的神经突触应该显示出明显的黑色沉积物,这些沉积物应该清晰地勾勒出神经元的形态,包括树突和树突棘。

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背景颜色:背景颜色不宜过深,深背景可能会影响对神经突触的观察。如果背景颜色深,可能是因为溶液A和B没有提前24小时配置或脑组织在A和B混合液中浸泡时间过长,超过14天。

阴性结果:如果出现阴性结果,可能是因为将动物进行灌注后再取脑进行实验,这可能会影响染色效果。

染色均匀性:整个切片的染色应该是均匀的,没有明显的染色不均或斑点。

神经突触结构完整性:染色后,神经突触的结构应该是完整的,没有明显的断裂或缺失。

使用图像分析软件:可以通过使用如Image J软件等图像分析工具来定量分析树突棘数量,这是评估染色效果的一个重要手段。

避免操作错误:确保在操作过程中遵循正确的步骤,避免如溶液混合不当、组织处理不当等操作错误,这些都可能影响最终的染色效果。


FD Rapid GolgiStainTM试剂盒的研究成果

改进和简化Golgi-Cox技术:FD Rapid GolgiStainTM试剂盒基于Ramón-Moliner、Glaser和Van der Loos描述的方法原理设计,显著改善和简化了传统的Golgi-Cox技术。

高灵敏度和可靠性:该试剂盒被证实在显示神经元和神经胶质细胞,尤其是树突棘的形态细节方面极为灵敏可靠。

广泛的应用:FD Rapid GolgiStainTM试剂盒已被广泛应用于多种动物大脑和死后人脑样本的染色检测中。

研究成果支持:有超过500篇文献数据支持FD Rapid GolgiStainTM试剂盒的使用,这些文献详细记录在试剂盒的使用手册中。

形态学研究:使用该试剂盒可以发现经药物处理后的动物大脑以及因神经性疾病死亡人体大脑内神经树突和树突棘的微小形态学改变。

行为-形态关系研究:Golgi-Cox法曾用来鉴定和研究心脏自主神经支配,显示了其在鉴定和研究外周血组织自主神经支配的形态学特征方面的有效性。

高尔基染色技术的应用:FD Rapid GolgiStainTM试剂盒不仅用于解剖研究,而且广泛用于行为-形态关系研究。

FD Rapid GolgiStainTM试剂盒是一个在神经形态学研究领域内被广泛认可和使用的工具,它为研究神经元和神经胶质细胞的形态提供了一个可靠和高效的平台。





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