Cayman的丙氨酸转氨酶（ALT）比色活性测定试剂盒提供了一种检测血清、血浆、组织样本和细胞裂解物中ALT活性的便捷方法。ALT活性的测量是通过监测使用乳酸脱氢酶（LDH）的偶联反应系统中NADH氧化的速率来进行的。NADH氧化为NAD+的同时，340nm处的吸光度降低。在ALT活性是限速的情况下，速率下降与样本中的ALT活性成正比。
需要但未提供：请下载试剂盒小册子，以验证此检测是否需要超纯水（Milli-Q或同等产品）或任何其他成分。
警告：本品不适用于人类或兽医。
测定方案：
艾美捷Cayman的丙氨酸转氨酶活性分析试剂盒（#700260-96），提供了一种方便的方法，用于检测血清、血浆、组织样本和细胞裂解液中的ALT活性。通过监测乳酸脱氢酶（LDH）耦联反应系统中NADH氧化的速率来测量ALT活性。NADH氧化成NAD*伴随着在340纳米处吸光度的降低。在ALT活性成为速率限制步骤的情况下，速率的降低与样本中的ALT活性直接成比例。
执行测定：
1. 阳性对照孔 - 在板中z定的孔中加入150μl的底物、20μl的辅因子和20μl的阳性对照。
2. 样本孔 - 在板中z定的孔中加入150μl的底物、20μl的辅因子和20μl的样本。
3. 覆盖板并在37℃下孵化15分钟。
4. 移除板盖，并迅速通过向所有使用的孔中加入20μl的ALT启动剂来启动反应。
5. 立即在37℃下每分钟测量一次340纳米处的吸光度，持续10分钟。如果ALT活性较低，继续读取长达60分钟。注意：背景孔（可选）- 在评估样本中的ALT活性时，背景活性通常不重要。然而，如果需要，可以为每个样本获得背景值。对于每个正在测定的样本，在板中z定的孔中加入150μl稀释的测定缓冲液（不含ALT底物）、20μl的样本、20μl的ALT辅因子和20μl的ALT启动剂。立即在37℃下每分钟测量一次340纳米处的吸光度，持续10分钟。如果ALT活性较低，继续读取长达60分钟。
图. 猪心丙氨酸转氨酶的活性
