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2025/1/4 14:57:08·真空离心浓缩仪在法医 DNA 样本浓缩的应用·
浓缩作为微量疑难检材提取中常用的方法,目前常用的有Amicon离心超滤管、DNA Clean & Concen⁃trator-5 试剂盒、Microcon-100 法等,以上浓缩均需在不同的管柱间转移 DNA 模板,不可避免造成 DNA 损耗,同时增加了污染的概率。
真空离心浓缩技术是改良的物理浓缩法,其原理是利用离心力、加热和真空作用挥发液体,达到浓缩、干燥 DNA 的目的。在达到固定转速后启动真空抽吸,挥发的液体回收至密闭容器,有效避免样品交叉污染和实验室污染。该方法可同时浓缩多个样品,通过去离子水量调节浓缩倍数,具有一定的简便性和灵活性。
48 份现场物证 DNA 模板经真空离心浓缩仪浓缩 4.4 倍至 7.7 倍后,获得的图谱分型峰高明显提高。峰值均衡性改善,判别出部分非特异性带和假纯合子,等位基因数由 1334 个增加到 1942 个,有效分型样本由 19 份增加到 27 份。部分样本图谱质量显著改善(见图 1)。
真空离心浓缩技术有以下特点:①浓缩时间相对短。45℃下,恒温混匀仪干燥 50μl 液体耗时 8小时以上,真空离心浓缩技术仅需约 1 小时;②浓缩和回收液体均在密闭环境中,降低实验室污染风险;③操作便捷,浓缩倍数灵活,浓缩过程一管完成,DNA 损耗少;④经济实用。
仅需一台真空离心浓缩仪,即可在现有的提取纯化方法基础上长期应用。真空离心浓缩技术适用于提取纯化后模板体积较大、抑制物少、原检验图谱分型不理想的DNA 样本浓缩,可以提高微量疑难检材的检验成功率。
海朗Hallan真空离心浓缩仪可同时处理多个样品,无需担心交叉污染。系统内程序可设定至多36个,主机可根据不同的样品对整机的真空度进行调节,设备采用皮拉尼真空计可实时显示腔体内的真空度,并保证真空度的真实性,真空设置范围0.1~1000mbar,控制精度0.1mbar。根据不同的样品可对整机转速进行调节,更换转子无需使用工具,且可与冻干系统联用。
参考资料:doi:10.13618/j.issn.1001-5728.2019.05.010