北京百欧博伟生物技术有限公司
2025/1/6 14:50:09百欧博伟生物：食品中脂肪的存在形式有游离态的，也有结合态的。游离态的脂如动物性脂肪和植物性脂肪。结合态的脂如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等中的脂肪与蛋白质或碳水化合物等成分形成的结合态。对大多数食品来说，游离态的脂肪是主要的，结合态的脂肪含量较少。
一、提取剂的选择
脂类的结构比较复杂，到现在没有一种溶剂能将纯脂肪萃取出来，也就是说提取出来的都是粗脂肪。（大部分是脂肪，还有一些其他成分）。
前面讲性质时讲到，脂类不溶于水，易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂。常用的溶剂有石油醚、氯仿—甲醇混合溶剂。其中溶解脂肪的能力强，应用泛。下面我们讲他们的特点：
（非极性）的优缺点
1、优点
（1） 的沸点低为34.6℃
（2） 溶剂脂肪能力强大于石油醚
2、缺点
（1）能被2%的水饱和
（2）含水的抽提能力降低（氧与水能形成氢键使穿透组织能力降低，即抽提能力下降）
（3）含水的乙醇是非脂成分溶解，而被抽提出来，使结果偏高（糖蛋白质等）
（4）使结果偏高，而且易燃。
下面我们有一组试验，通过实验我们可以比较一下结果
提取卵磷脂 25℃ mg / 100g
低分子成分 无水 含水
葡萄糖 10.5mg/100g 315mg/100g
蔗糖 15mg/100g 150mg/100g
丝氨酸 0 15mg/100g
NaCl 0 25mg/100g
由此可见，乙醇含水后，能将样品中非脂成分溶解增加结果的重量，因此，使用时，样品不能含水分，必须干燥。而且使用时室内需空气流畅。因为在空气中，允许浓度为400ppm，超过这个极限易爆炸。
另外一般贮存在棕色瓶中放置一段时间后，光下照射就会产生过氧化物，过氧化物也容易爆炸，如果贮存时间过长，在使用前一定要检查有无过氧化物，如果有应当除掉。
3、检查过氧化物的方法
中+少量的Fe2++少量KCNS待到红色出现 ，说明有过氧化物存在，反之为无色，排除过氧化物的方法如下。
4、排除过氧化物的方法
含过氧化物+FeSO4(少量) ------ 可除掉过氧化物
石油醚
石油醚溶解脂肪的能力比弱些，但吸收水分比少。没有易燃。使用时允许样品含有微量水分，它没有胶溶现象，不会夹带胶溶淀粉、蛋白质等物质。采用石油醚提取剂，测定值比较接近真实值。
对于石油醚这两种溶剂适用于已烘干磨碎样品，不易潮解结块的样品，而且只能提取样品种中游离态的脂肪，不能提取结合态的脂肪，对于结合态脂，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。有时利用两种溶剂的优点，常常混合使用。
氯仿-甲醇
氯仿-甲醇是另一种有效的溶剂，它对于脂蛋白，磷脂的提取效率较高，特别适用于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。
二、样品的预处理
样品的预处理方法决定于样品本身的性质，牛乳预处理非常简单，而植物和动物组织的处理方法较为复杂。
1、粉碎
粉碎的方法很多，不论是切碎、碾磨、绞碎或者采用均质等处理方法，应当使样品中脂类物理、化学以及酶的降解都要减小到最小程度。
2、加海砂
有的样品易结块，用提取较困难，为了使样品保持散粒状可以加一些海砂，一般加样品的4-6倍量（目的使样品疏松，这样扩大了与有机溶剂的接触面积，有利于萃取）。
3、加入无水硫酸钠
因为可被2%水饱和，使不能渗入到组织内部抽提脂肪的能力降低，所以有些样品含水量高时可加入无水硫酸钠，用量以样品呈散粒状为止。
4、干燥
干燥的目的：提高脂肪的提取效率。
干燥时要注意温度：温度过高（1）脂肪氧化（2）脂肪与糖、蛋白质结合变成复合脂；温度过低：脂肪易降解
5、酸处理
温度过高时脂与糖、蛋白质等接触，变成复合脂，产生复合脂后，不能用外极性溶剂直接抽提，所以要用酸处理，主要是把结合脂肪水解出去，下面有个实验大家看一下：
面包：采用直接萃取 1.20% 脂肪，酸处理后萃取 1.73%脂肪
干全蛋：采用直接萃取 36.74% 脂肪，酸处理后萃取 42.39%脂肪
从这个实验可以看出，变成复合脂类，利用直接萃取得到的结果偏低，经过酸水解将使蛋白质，碳水化合物与脂肪分开，这样是脂肪游离出来后，再提取得到的数据准确。
6、对有些样品还有大量的碳水化合物，测定脂肪时应先用水洗掉水溶性碳水化合物再进行干燥、提取。
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