链脲佐菌素/STZ的使用方法--上海榕柏生物

链脲佐菌素是一种氨基葡萄糖-亚硝基脲,是一种DNA烷基化试剂，能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白（GLUT2 glucose trasport protein）独自进入细胞。对胰腺胰岛胰岛素诱发的β-细胞具毒性。链脲佐菌素对GLUT2阳性神经内分秘肿瘤细胞有毒性作用.

链脲佐菌素（链氮霉素;）

　　Streptozocin

MF:C8H15N3O7

　　MW:265.22

　　CAS:18883-66-4

　　性状：小片状或棱柱体结晶。有吸湿性。溶于水、低碳醇和酮。熔点115℃（分解）。在水溶液中很快变旋，比旋光度平衡值[α]D25 +39°。zui大吸收波长（乙醇中）：228nm（ε 6363）。半数致死量（雌小鼠，腹腔）360mg/kg。有毒。有致癌的可能性。

简介：

　STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用，能诱发许多动物产生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的给药方式有关：采用小剂量分次给药的方法，则建立与人类I型糖尿病表现相似的大鼠模型，如采用较大剂量一次性注射的给药方法，则建立与人类2型糖尿病表现相似的大鼠模型。其原理可能与胰岛的损伤程度有关。

　　Ⅰ型糖尿病模型：静脉或腹腔一次大剂量注射STZ所制得的大速发型糖尿病系胰岛β细胞的直接损害，55mg/kg大鼠腹腔注射STZ，致胰岛分泌减少而致血糖升高，出现糖尿病的表现。多次小剂量注射所制得的迟发型糖尿病模型则与T淋巴细胞介导的β细胞不断破坏有关：30mg/Kg多次注射STZ诱导，这样建立的模型与人类IDDM更接近。

　　Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂养1～2个月的大鼠，再加小剂量一次腹腔注射STZ，剂量在25～40mg/Kg或参考文献（鼠均重不同，本剂量以200克均重为例）。

配制方法：

柠檬酸缓冲液的配制

　柠檬酸（FW：210.14）2.1g加入双蒸水100mL中配成A液。

  柠檬酸钠（FW：294.10）2.94g加入双蒸水100mL中配成B液。

链脲佐菌素配制液

　　用时将A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1：1的），PH计测定ph值，调节ph=4.2-4.5，即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。

　　注射时用柠檬酸缓冲液以1%的浓度溶解STZ，按空腹体重注射相应的STZ，在30分钟内注射完毕。★STZ容易失活，STZ快速称取后仍要求干燥避光，推荐用干燥铝箔（或锡箔）纸。

　　禁食12小时以上（一般过夜禁食，不禁水）。禁食的时间越长，STZ对胰岛β细胞的破坏力越明显，即药效越高。所以相对禁食时间延长，可以降低STZ的用量。尾部注射即静脉注射，药物利用率较高，同比腹腔注射，可以节省药量，缺点是操作起来不如腹腔注射方便。

　　过夜禁食后称重，按大鼠总重量比称取STZ，放一干燥灭菌瓶内，外用锡纸包好，将柠檬酸缓冲液及装STZ的瓶子置冰浴，一起带到动物房，如果注射操作技术不熟练，应两组交替注射，建议分组溶解STZ，比如10只或15只鼠/组。推注的速度快，更容易形成高血糖，推注的速度慢，相对的危险性较低，但也不容易成模，常规操作中多要求快速注射。当然，STZ的剂量是决定血糖高低的主要因素。

死鼠问题的解决

　　鼠的个体差别和空腹（低血糖）抵抗力的差异而致死亡率的不同，开始死亡率高可能主要是血糖突然升高，鼠不适应，或发生了DKA（即酮症酸中毒）。

　　首先，一定要保证足够的饮水量（饮水量不足容易导致死鼠）；

　　其次，高血糖和低血糖都会造成死鼠，避免死鼠可以通过注射胰岛素或暂时补糖，两种途径：1、常见为血糖过高。补胰岛素法，补一些中效胰岛素。例如给诺和灵n或NPH（中性鱼精蛋白锌胰岛素），每次2--3个单位，过了3-5天，大鼠一般死亡率就低了；2、补糖法，禁食后的鼠，注射的时候已经处于低血糖状态，造模4小时后腹腔注射百分之20的葡萄糖，可避免因注射时血糖过低死鼠；

　　再次，防止动物自相残杀。食物缺乏和供水不足的情况下，会互相厮杀、啃食同类，所以食物和饮水要供应充足，是两路供应；

　　zui后，防止感染。糖尿病大鼠尿量多，垫料潮湿，需要勤换垫料，所以糖尿病大鼠较其他大鼠容易出现感染，特别是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血测血糖等侵入性操作前后，要注意消毒工作。如每次采血测血糖后可用四环素（或金霉素眼药膏）局部涂抹处理伤口预防感染。

　　模型不*，三天后补注STZ（以10mg-20mg/kg体重剂量腹腔注射），也很容易成模，或让血糖恢复正常后再常规剂量注射；但要达到理想的效果，往往是恢复到正常状态下重新造模

保存方法：

-8℃，干燥避光保存。（注：本品易潮解，如需反复取量过程中，应避免接触其受水受潮，受潮后30分钟后失效，这和注射时要求其快速注射是一个道理，即其水溶液不稳定）。

　　链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）对机体组织毒性相对较小，动物存活率高，是目前国内外使用较多的制备糖尿病动物模型的药物。--链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ，1g/瓶（灭菌装）=900/g；1g/瓶（普通装）=750/g；5g/瓶=700/g），min≥98.89，SigmaS0130）产品，使您的研究没有后顾之忧。--上海榕柏生物技术有限公司--技术部转