技术文章

    TO型生物制片透明剂（简称TO试剂

        1.2 方法  ①按照病理检查的目的和要求切取适当大小的组织块。②使用全自动组织脱水机对切好的组织块进行固定，脱水、透明、浸蜡，透明是采用TO试剂代替二甲苯，时间是30分钟/缸，共二缸。③将处理好的组织常规石蜡包埋，在石蜡切片机上切成3-4um的切片。将切片放入60-65℃左右烤箱内烤30分钟即可，取出即放入TO试剂中脱蜡，时间 8-10分钟/缸，共三缸。④常规HE染色后烤干切片。⑤用中性树胶封固，阅片（中性树胶采用TO试剂代替二甲苯进行溶解）。
        2  结果
        透明：时间比二甲苯多10分钟/缸,组织透明良好，透明后浸蜡良好。切片：不易脆裂，组织软硬适中，厚薄均匀（3-4um），脱蜡：脱蜡干净*，时间与二甲苯无明显差异。

        3  讨论
        TO试剂是一种以松节油为主要原料，并采用特殊配方合成的无色芳香透明液体，它有松香气味，不溶于水，挥发性好，松节油在空气zui高允许浓度为300g/m3［2］，>25度能与95%乙醇互溶，能溶解石蜡、树胶等。TO试剂折光率1.46，与玻片的折光率1.50相似，因而能使其透明和封固的切片镜检清晰。
        TO试剂安全无毒无臭味:透明效果理想;长时间浸泡组织不会使组织变脆，还能增强浸蜡效果，反而有利于切片;不与水汽混合，即使在潮湿的环境中使用，也不会因吸收水汽而浓度下降;不易变质，可长期存放。
        TO试剂在脱水过程中，按正常的脱水步骤操作，把二甲苯换成TO试剂，透明时间控制在20-30分钟左右 （夏季短点，冬季长点），TO试剂在25度以下溶解石蜡比较慢，当温度超过35度时，溶解蜡的速度明显加快，50度时溶解石蜡的速度与二甲苯差不多。在冬季，如果工作室内的温度较低，建议把玻片放盛有TO试剂的梁色缸中，然后把染色缸放烘箱中脱蜡，分二至三缸，脱蜡时间8-10分钟左右。在气温较高的季节或常年气温较高的省份，可以把烘箱中刚烤好的玻片连同染色架趁温度高时直接放入不加温的TO试剂中，分三缸，脱蜡时间 20分钟左右，TO试剂还能用来稀释中性树胶，比例为1:1，不过溶解速度慢，可以放在烘箱中使其较快充分溶解。
        TO试剂还可用于其它病理制片中，如：免疫组化、冰冻切片、特殊染色等，该产品由广西农学院与广西岑溪松香厂联合研制，经广西壮族自治区药检所的毒理检验，安全无毒，产品推出后在全国大面积使用，经过五年的实践，该产品透明效果理想，切片质量与二甲苯无异，还不会出现二甲苯浸泡时间长易碎片。