化学发光技术

放射免疫分析法有很高的灵敏度，但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来，许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中，在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法，由于这种方法具有灵敏度高，特异性强，精密度好，线性范围宽，仪器设备简单，试剂价格低廉，方法稳定、快速等优点，已成为一种重要的非同位素标记免疫学检测方法。

把化学发光物质与免疫学反应结合起来，用光反应表现被测的免疫成分浓度，即把高灵敏的光反应与特异性的免疫学反应相结合的方法，称为化学发光免疫分析技术。

化学发光技术是将发光物质（如吖啶酯、鲁米诺等）标记抗原或抗体进行反应，发光物质在反应剂（如过氧化阴离子）激发下生成激发态中间体，当激发态中间体回到稳定的基态时发射出光子，用自动发光分析仪接收光信号，测定光子产量，以反映待检样品中抗体或抗原含量。化学发光免疫分析方法的检测灵敏度要远远高于ELISA、荧光免疫等，而优于或与同位素检测相当；在使用方便性上，化学发光与传统ELISA方法一样简单易用；在对人体和环境的危害上，化学发光对此没有任何担忧。

目前，越来越多的免疫检测项目通过化学发光免疫检测来进行，以代替传统的ELISA和放射免疫分析法。

化学发光免疫分析包括三大类型：标记化学发光物质的化学发光免疫分析、标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析和标记酶的化学发光酶联免疫分析。

zui近的一些分子生物学进展使得一些生物技术工具极大提高了生物发光和化学发光的检测和快速应用。生物发光和化学发光（BL／CL）的主要特点就在于发光信号的高度可测性，可以用PMT（光电倍增管）和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内，CL反应的特点是高光子产生效率，BL为0．5～0．8，CL为0．1-0．001。因此BL／CL的检测极限可以达到10-21～10-18mol，这显然要比其他的光学技术强得多。BL／CL已经广泛的应用到免疫检测中进行标记物的超灵敏检测。

CL免疫检测不但可以通过以CL分子直接标记抗原或抗体，也可以以CL底物标记可被检测的酶。相比同位素检测，CL检测以其更加灵敏和可检测性获得越来越多的应用。