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2012/8/9 15:42:48简析牛转铁蛋白ELISA 检测试剂盒内容及配制
试验原理:
TF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TF和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TF的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记的抗TF抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
标本稀释液 | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。牛转铁蛋白ELISA 试剂盒
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400 ng/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200 ng/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100 ng/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50 ng/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25 ng/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5 ng/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0 ng/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。牛转铁蛋白ELISA 试剂盒
牛转铁蛋白ELISA 试剂盒