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简析牛转铁蛋白ELISA 检测试剂盒内容及配制

上海研生生物技术科技有限公司

2012/8/9 15:42:48

简析牛转铁蛋白ELISA 检测试剂盒内容及配制

试验原理

TF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA.已知TF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TF和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物AB,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TF的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

试剂盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶标板

1块板(96T

半块板(48T

即用型

塑料膜板盖

1

半块

即用型

标准品:400ng/ml

1瓶(0.6ml

1瓶(0.3ml

按说明书进行稀稀

空白对照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

即用型

标准品稀释缓冲液

1瓶(5ml

1瓶(2.5ml

即用型

生物素标记的抗TF抗体

1瓶(6ml

1瓶(3.0ml

即用型

亲和链酶素-HRP

1瓶(10ml

1瓶(5.0ml

即用型

洗涤缓冲液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

按说明书进行稀释

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

终止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

标本稀释液

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

即用型

自备材料

1. 蒸馏水。牛转铁蛋白ELISA 试剂盒

2. 加样器:5ul10ul50ul100ul200ul500ul1000ul

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1. 避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

试剂的准备

1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:

400 ng/ml

6号标准品)

原倍浓度不用稀释直接加入50ul

200 ng/ml

5号标准品)

100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液

100 ng/ml

4号标准品)

100ul5号标准品加入100ul的标准品稀释液

50 ng/ml

3号标准品)

100ul4号标准品加入100ul的标准品稀释液

25 ng/ml

2号标准品)

100ul3号标准品加入100ul的标准品稀释液

12.5 ng/ml

1号标准品)

100ul2号标准品加入100ul的标准品稀释液

0 ng/ml

(空白对照)

原始浓度不用稀释直接加入50ul

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。牛转铁蛋白ELISA 试剂盒

牛转铁蛋白ELISA 试剂盒

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