DNA电泳常见问题分析
常见问题 可能原因 建议解决方案
DNA降解避免核酸酶污染
电泳缓冲液陈旧
电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值升高，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。
建议经常更换电泳缓冲液。
电泳条件不合适
电泳时电压一般不超过20V/cm，温度<30℃，大分子量DNA电泳时温度应<15℃，检查电泳
缓冲液是否有足够的缓冲能力。
DNA上样量过多减少凝胶中DNA的上样量
DNA含盐量过高电泳前通过乙醇沉淀除去过多的盐等杂质
DNA条带模糊
DNA有蛋白污染电泳前用酚/氯仿抽提除去蛋白等杂质
DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
对于λ Hin dⅢ 片段
cos位点复性
电泳前于65℃加热DNA5分钟，然后在冰上冷却5分钟。
电泳条件不合适
电泳时电压一般不超过20V/cm，温度<30℃，大分子量DNA电泳时温度应<15℃，建议经常
更换电泳缓冲液。
DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
DNA上样量不够增加凝胶中DNA的上样量
DNA降解避免核酸酶污染
DNA电泳常见问题分析
DNA跑出凝胶缩短电泳时间、降低电压、提高凝胶浓度
对于EB染色的凝胶所
用光源不合适
应用短波长（254nm）的紫外光源
小分子DNA跑出凝胶缩短电泳时间、降低电压、提高凝胶浓度
分子大小相近的DNA
带不易分辨
延长电泳时间并核准正确的凝胶浓度
DNA变性电泳前勿加热并用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
条带很弱或
无DNA条带
DNA分子量太大常规
凝胶不合适
在脉冲凝胶电泳上分析
上海索莱宝
