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小鼠科研试剂盒使用说明书

上海科兴商贸有限公司

2012/9/27 9:57:40

小鼠科研试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:                                                         48T

0.5U/L -16U/L

 

 

小鼠科研试剂盒组成

1

20倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

3ml×1

2

酶标试剂

3ml×1

8

标准品(32U/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×4

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

3ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

3ml×1

11

封板膜

2 

6

显色剂B

3ml×1/

12

密封袋

1

小鼠科研试剂盒标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠科研试剂盒操作步骤

1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

16U/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

8U/L

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

4U/L

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

2U/L

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

1U/L

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

 2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.         温育:用封板膜封板后置37温育30分钟。  

4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.         温育:操作同3

8.         洗涤:操作同5

9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37避光显色15分钟.

10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

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