普通培养基制备方法

普通培养基制备方法：

1. 营养肉汤

制作方法：将上述后三种成分加入到肉水中，稍加温溶解之；用1mol/L的NaOH调pH值到7.4－7.6；滤纸过滤，分装；0.112MPa15－20分钟消毒灭菌。

用途：供一般细菌生长的液体培养基，生长后可检查其生长情况（混浊度、沉淀、菌膜等）；也是制作固体培养基的基础培养基。

肉水的制备：将500 g瘦牛肉，切成小块或绞碎，加1 000ml蒸馏水，浸泡一夜（夏季应置10℃左右以防*），煮沸约1小时，用纱布滤去肉渣，再用滤纸滤过，补足原有水量，装入烧瓶中消毒（0.112MPa20分钟），放冷暗处备用。

2. 营养琼脂

成分：

制作方法：将琼脂加入到营养肉汤中，加热使之融化；调pH值到7.4－7.6；用纱布过滤，高压灭菌（0.112MPa，20分钟）。

用途：一般细菌的分离、纯培养、观察菌落性状及保存菌种用；为特殊培养基的基础。

3. 半固体培养基：与营养琼脂的制备基本相同，仅将琼脂量减少至0.1％－0.7％（即1000ml中加入5-7g琼脂）即可。

4. 鲜血琼脂：将灭菌的营养琼脂加热融化，冷却至45-50℃时，加入5％－10％无菌鲜血（一般为绵羊或兔血），分装试管，摆成斜面或倾注于平皿，待凝固后，置37℃培养 1－2日，有污染者废弃，无菌者保存于冰箱备用。

无菌鲜血以无菌手术采取健康动物（通常是绵羊或家兔）血液，加到盛5％柠檬酸钠溶液的容器中（血与抗凝剂之比为9：1），混匀；或加到盛有灭菌玻璃珠的容器中，反复摇动多次制成脱纤血，置冰箱中备用。

5. 厌气肉肝汤

成份：

制备方法：取除脂肪及筋膜的牛肉，用绞肉机绞碎和切成100g左右的肝块各一块，加蒸馏水4份；煮沸30－60分钟，补足失去的水份，用白布过滤，弃去肉渣，取出肝块，滤液加入蛋白胨1％和NaC1，加热溶化，以2 mol/L NaOH溶液调pH值为7.8－8.0，加热煮沸，以滤纸过滤，按量加入0.2％葡萄糖，搅拌，使其溶化；将煮过的肝块洗净，切成小方块，用蒸馏水充分冲洗后，分装于试管中或中性玻瓶内，其量约为预计分装肉肝汤量1/10；将滤液分装于含有肝块的中性容器中（如为试管，还应加适量的液体石蜡），以0.075MPa高压灭菌 30－40分钟。供一般厌气菌培养及无菌检验之用。

6. 石蕊牛奶培养基

成分：

制法：新鲜牛奶，除去乳脂；加入石蕊溶液，使之成淡紫色；分装于试管中，可加适量液体石蜡；0.075MPa高压灭菌20分钟。用于一般细菌鉴定之用。用于厌氧菌的鉴定可加液体石蜡适量。

附：石蕊溶液制法：取精制石蕊颗粒1g，加蒸馏水60ml，使充分溶解，以粗滤纸滤后使用。