适应无血清培养基
许多连续细胞系,如HeLa,CHO-K1或小鼠骨髓廇可能可以适应于缺乏血清的生长环境.适应过程常常是一个很长的选择周期,此间只有细胞群体中的少数被选择出来,因此在此选择过程中确保细胞系的性质不丧失是很重要的.如果是骨髓瘤细胞,其目的是用于制备杂交廇,而如果是CHO细胞则用于做转染实验,因此用无血清培养基的选择培养必须在融合和转染之前进行,使选择过程中丢失特性的危险性降到zui低.
适应无血清培养基通常要经过几次连续的传代培养,使血清浓度逐渐降低.一旦细胞在某一血清浓度条件下形成稳定的增殖状态,就可用更低浓度的血清将细胞传代培养,直至稳定的生长增殖再次形成,而后再次稀释血清.如果是悬浮培养,要计算活细胞的数量 ,根据活细胞的数量稀释细胞悬液,此时需要保持的zui低细胞浓度要比正常传代培养所需的细胞浓度高一些.对于单层细胞培养,可在传代培养的前几天先降低培养基中的血清浓度,而后再用新的低浓度培养基进行传代培养.在适应过程中,可能有必要在培养基中添加一些已知的因子来代替血清.
