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   小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa试剂盒使用说明书

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2013/4/18 9:22:19

小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa试剂盒使用说明书

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒组成

封板膜:2片(48/2片(96

说明书:1

密封袋:1

标准品:   2700ng/L 0.5ml×1 0.5ml×1瓶  2-8℃保存

酶标包被板:  1×48     1×96         2-8℃保存

样品稀释液: 3ml×1瓶  6 ml×1     2-8℃保存

显色剂A: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

显色剂B: 3ml×1 6 ml×1     2-8℃保存

终止液:     3ml×1 6ml×1     2-8℃保存

浓缩洗涤液:20ml×20倍)×1 20ml×30倍)×1瓶   2-8℃保存

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG)水平。用纯化的小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG),再与HRP标记的β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品小鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白β-TG)浓度。

目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)含量。

服务承诺: 

供货期:款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导 。
为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性(免费代测)。

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L1200ng/L 600ng/L300ng/L, 150ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟

4. 配液:将3048T20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水3048T20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 

10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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