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如何正确采集临床微生物学标本

北京盛基瀚森科技有限公司

2013/6/2 14:22:15

        正确的微生物学检验始自正确的标本采取。微生物学检验的标准化首先应从标本采取与处理的规范化开始。正确的采取、处理与运送细菌培养标本是临床细菌检验成功的关键。
  一、血液细菌培养

  临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌,才能进行有效的抗菌治疗,提高*和降低医疗费用。

  1、采血时机:应在用抗菌素治疗前,在患者发冷发热前半小时采血为宜。

  2、采血次数与间隔

  (1)急性感染患者:从两臂分别采2份血样。

  (2)感染性心内膜炎患者:24h内采血3次,每次间隔不少于30分钟。

  (3)发热原因不明患者:24~48h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。

  3、采血部位:多次采血时,应在不同部位进行。

  4、采血量:成年人采血量为10ml,新生儿与婴幼儿为1~2ml。每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。

  5、抗凝剂:0.025~0.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate,SPS)。SPS具有抗凝抗吞噬抗补体及拮抗某些抗生素的作用。

  6、培养条件:视患者的感染、用药情况选用不同的培养瓶。

  二、胸腹水及脑脊液标本

  1、采集:以无菌手续穿刺抽取,为防止凝固可直接注入培养瓶内。

  2、运送:用带盖的无菌容器送检。

  3、培养:接种前应离心或做增菌培养。

  三、尿液标本

  1、标本采集:应在用药前或停药5天后留取标本,并使尿液在膀胱内停留6-8h以上(给细菌足够的繁殖时间)。

  (1)清洁排尿法:冲洗尿道口后用无菌容器留取中段尿送检。

  (2)膀胱穿刺法:此法是收集尿液的方法,尤其对厌氧菌检查。

  (3)肾盂尿采集法:应请泌尿科医生采取,左右侧的标本要标记明确。

  (4)留置导管取尿法:应穿刺导尿管壁抽取尿液。

  结核分枝杆菌的检查,应留取24小时尿;检测衣原体时,尿液标本不能代替尿(阴)道分泌物;巨细胞病毒的检测,需多次检测标本,因其释放是周期性的。

  2、标本的运送和保存:用无菌带螺帽的容器盛标本,标本应在1小时内送检。

  四、痰标本:标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的诊断,导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的出现。

  1、标本采集:应在用药前或停药1天后留取标本。

  (1)自然咳痰:要求患者留痰前用清水漱口3次,用力咳出。首先用灭菌生理盐水将痰液洗3次,然后将痰块打碎,制成悬液后再接种。

  (2)气管穿刺法:适用于昏迷患者。

  (3)纤维支气管镜抽取法:适用于纤维支气管镜检查或治疗的患者。

  (4)胃液抽取法:适用于婴幼儿患者。

  五、咽拭子

  1、拭子的选择:要求无菌、不含抑制剂;

  2、预先沾湿拭子;

  3、直取感染部位,减少污染。

  六、生殖道标本

  1、男性患者:

  (1)尿道标本:清洗龟头,用碘伏等消毒后,挤出分泌物或以细拭子插入尿道口旋转采取分泌物送检。

  (2)前列腺标本:应由医师按摩前列腺,以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。

  2、女性患者:(1)成年患者:应在扩阴器的支持下,以无菌棉拭子取分泌物送检。

  (2)未成年患者:不应使用扩阴器,应以无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。

  七、厌氧菌检查

  厌氧菌是人体许多部位(如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道)正常菌群中的一部分,因此下列材料无需做厌氧菌培养:(1)咽、鼻、尿道或直肠拭子。(2)咳出的痰,通过支气管镜取的分泌物,排出或导出的尿、粪及胃内容物。

  1、正确地选择标本:为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染,用注射器抽取标本比用拭子更好,特别适用于下列临床情况:

  (1)从未开放的脓肿抽取脓液。

  (2)通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。

  (3)从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集的尿。

  (4)气管切开吸取的肺分泌物。

  (5)穿刺抽出的腹腔液。

(6)通过腰椎穿刺抽出的脑脊液。

  (7)窦道标本可插入小导管用注射器吸出,注射器和针头内的气体应全部排出,将其内容物直接注入一个已排出气的无菌试管内。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。如果必须使用拭子,应尽快接种于适宜的培养基中。

  2、正确地运送厌氧菌标本:临床标本一旦离开人体部位,在进入厌氧环境前,必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或管,在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素,因它会抑制细菌生长。

  八、脑膜炎奈瑟菌的检查

  根据病期不同,采集的标本也有所不同。菌血症期病人可采取血液;出现出血点或瘀斑者,可挑取瘀斑渗出液;如出现脑脊髓膜刺激症状者,必要时可抽取脑脊液;上呼吸道感染期的疑似病人和带菌者,可取鼻咽腔分泌物进行检查。因该菌易自溶,故应立即送检,在床边接种。

  九、支原体及衣原体检查

  支原体和衣原体主要在人的泌尿生殖道的上皮细胞内生长,应该以棉拭子采取标本。尿标本应离心取沉淀。

  十、粪便标本

  1、标本采集:应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集,稀便不少于1ml,固体便不少于1克,无便患者可用直肠拭子采集标本。

  2、显微镜检查:粪便直接涂片革兰染色,可作为艰难梭菌、弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、念珠菌等的初步筛查,更能作为菌群失调的直观判断。

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