磷酸盐缓冲液的配制方法

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，简称PBS）的是常用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及 磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不*相同。

磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法：

称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，zui后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2（1034×105Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
 PH            7.6      7.4         7.2        7.0
H2O       1000     1000     1000     1000
NaCl         8.5      8.5        8.5         8.5
Na2HPO4 2.2      2.2       2.2         2.2
NaH2PO4 0.1      0.2       0.3         0.4

根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。