技术文章

细胞周期分析PI染色法

北京博蕾德科技发展有限公司 >> 进入商铺

2013/6/19 11:30:21

细胞周期流式检测(PI染色法)

1. 收集细胞:若悬浮生长细胞离心弃培养基,用PBS洗涤一次(建议用PBS + 1% FBS或PBS + 0.1% BSA),若是贴壁生长细胞,加入合适体积的0.25%胰酶消化一分钟左右(可显微镜观察待细胞脱壁),吹起细胞后加入5ml 含10%血清的培养基,终止作用,转移细胞至15ml离心管中,300g 离心5分钟,用PBS洗涤细胞一次;

2. 用PBS洗涤细胞一次,300g离心5分钟后弃上清;

3. 用500ul PBS 重悬细胞,振荡混匀后加入5ml 70%冷乙醇溶液(放置在-20度预冷的70%乙醇溶液),混匀后放置4度过夜(可放置一周);

4. 500g离心5分钟后弃乙醇,用PBS悬浮细胞洗涤细胞一次;

5. 用PBS调节细胞浓度为5 X 106个/ml,取500ul细胞悬液加入100ul  500ug/ml 的PI染色(用PBS配制500ug/ml的PI染色液),4°C避光放置30分钟;

6. 加入100ul 煮沸过的RNase A (10mg/ml) 37度孵育30分钟;

7. 混匀细胞后待上流式仪获取分析。

 

订购信息:

10010-02
Aposcreen Annexin V Apoptosis Kit-FITC
100tests
 
现货供应
10010-09
Aposcreen Annexin V Apoptosis Kit-PE
100tests
 
现货供应
556547
ANXN V FITC 调亡盒子  KIT
100tests
 
现货供应

相关产品

猜你喜欢

当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :