技术文章

简介

WD-2型微电极拉制仪采用垂直方式拉制玻璃管，此拉制方式是目前通用的。其拉制原理是：利用金属丝（钨丝或铂丝绕成螺旋状）通过大电流使玻璃管加热到熔点，利用重力拉断。其操作简便，可重复性水平高，适用于细胞内记录和膜片钳记录等所需的各种玻璃微电极的制作。更有玻璃管的夹持范围宽（直径1.0—2.0mm的玻璃管均可拉制），采用数码管显示使拉制的参数可视化等特点。

安装及使用

取出仪器后，先将砝码和连接杆固定好（如图1所示砝码位置）。再将220V的交流电源接上后面板的电源插孔，然后打开机箱右侧底部的电源开关即可使用。另外，仪器一定要放置平稳。封面中仪器外图的右脚是可以升降以便调节仪器的平稳的。为了适应不同用户的需要，该仪器的拉制方式分为两种：

1. 一次拉制（通用型的）：

一次型加热，把玻璃管拉制成对称的两半，二者均可使用。

1. 两次拉制：

分2次加热将玻璃管拉制成电极。

*步将玻璃管软化，拉长一个短距离（2—10mm），使玻璃管变细（zui窄点达200—400μm），随后再对玻璃管加热做第二次拉伸，使玻璃管拉制成对称的两半，二者都可使用。

图1玻璃管的夹持和加热          图2控制加热参数和拉制方式的选择

不同的拉制方式，使用的加热丝和负重砝码都是不同的。一般来说：

1. 一次拉制时则使用长的加热丝，砝码相对也要选择重的。

2. 两次拉制时使用的加热丝要短，砝码要选择轻的；

选择好相应的加热丝和负重砝码后，接着是安装玻璃管（见图1）和加热参数的设置（见图2）。不同的拉制方法，其操作步骤也有所不同。

一、一次拉制的操作步骤如下：

1. 先用“加热丝调节旋钮”将“加热丝底座”旋至zui顶部（即零刻度线上）。这个旋钮是可以伸长的（以便操作）；

2. 再将带有“夹头2”的底座抬至zui顶部（基本靠近“加热丝底座”），将“锁紧旋钮”旋转90度（即与面板垂直方向），将其固定住。

（值得注意的是，只有在“锁紧旋钮”垂直向下时，才能抬动底座至zui顶部）

1. 打开“屏蔽罩”，旋转“旋钮1”和“旋钮2”，使得“夹头1”和“夹头2”松开至可将玻璃管放入即可；

2. 将玻璃管由上（“夹头1”处）而下放入，先拧紧“夹头1”（由外向里旋转“旋钮1”），再拧紧“夹头2”（由外向里旋转“旋钮2”）。

3. 玻璃管一定要确保从加热丝的中心穿过。以免拉制出的微电极形状不均匀（“加热丝”两端的螺丝可用于调节其中心位置的）；

4. 设置加热参数：

1）、打开电源开关后，按下“拉制1按钮”；

2）、通过“拉制1旋钮”来调整“数码显示管”中显示的加热指数（也就是调节加热功率）；

1. 松“锁紧旋钮”（使其垂直向下），确保“夹头底座”不向下滑落（如果下滑，应检查第4步中的夹头是否拧紧）。并检查“限位条”是处于图1所示位置。（如果忘记松“锁紧旋钮”，“夹头底座”就不能自由下落；“限位条”也必须处在图1所示位置，这样才能进行拉制。）   

2. 关上“屏蔽罩”，按下“加热按钮”，开始加热、拉制。

3. 当玻璃管拉断、落下后，加热自动停止。取下上下两支成型的微电极，放置好待用。

二、两次拉制的操作步骤如下：

第1——第5步与上述的一次拉制的操作步骤相同；

6、向右旋转“限位条升降旋钮”，可将“限位条”下降0——10（mm）的高度（“限位条”内有刻度可查）。设下降的长度为L（mm）；

7、再向左旋转“限位条转动旋钮”，将“限位条”旋转至“夹头底座”的下方；

8、设置加热参数：

1）、打开电源开关后，按下“拉制1按钮”；

2）、通过“拉制1旋钮”来调整“数码显示管”中显示的加热指数；

 （注：此时调整的加热指数是用于*次加热，只将玻璃管软化并拉长到第6步中用“限位条升降旋钮”设置好的距离L（mm））

3）、再按下“拉制2按钮”；

4）、通过“拉制2旋钮”来调整“数码显示管”中显示的加热指数；

 （注：此时调整的加热指数是用于第二次加热，将玻璃管拉断、成型为电极）

5）、分两次设置的加热指数，仪器内可自动存储，只要不改变当前的参数，下次拉制时可直接使用，不需要再行设置。

9、松“锁紧旋钮”（使其垂直向下），按下“加热按钮”，

开始*次加热、拉制；

10、到达第6步中设置的位置L时，加热自动停止；

11、旋转“限位条转动旋钮”，将“限位条”向左旋转至图2中所示位置；

12、这时还需要对加热丝的高度做调整。旋转“加热丝调节旋钮”，使加热丝向下移动一定的距离。具体的距离由第6步中设置的刻度L（mm）决定，一般来说是2/3*L（mm）。

13、再次按下“加热按钮”，开始第二次加热、拉制；

14、当玻璃管拉断、落下后，加热自动停止。取下上下两支成型的微电极，放置好待用。

15、zui后旋转“加热丝调节旋钮”，将加热丝移回zui顶处，以便下次拉制。

三、注意事项

1. *次加热时，加热丝表面往往会产生细烟，那是附在加热丝表面的氧化物燃烧造成的。

2. 该仪器的使用环境尽量在空气流通较小的范围内进行。

3. 刚开始加热时，有个升温的过程，加热丝看上去是逐渐变红的，需稍等片刻，切勿手摸！建议在正式拉制玻管前，先预热几次，以保证拉制的一直性。

4. 加热停止后，取微电极时，切勿直接用手触摸，因为刚拉断的电极余温很高。

5. 拉制好的电极尖部很易受损，应尽量避免抖动、和其他物品接触。

6. 在使用“锁紧旋钮”时需注意，拉制时要让旋钮杆垂直向下。

7. 在拧紧上、下两个夹头时，如果将玻璃管压断，需要用小毛刷将附在夹头表面的碎玻璃清理干净，才能再次安装玻璃管。

8. 在使用“一次拉制”方式时，不要触动“限位条”。

9. 为了安全，在“夹头底座”没有抬起或“限位条”被压住的时候，是不能进行加热的。

10. 更换砝码的时候，如果拉杆和砝码连接后不能断电，可适当调节拉杆的连接深度。

四、加热参数的设置

由于用户的需求不同，微电极的阻抗和的长短要求也不同，外界的环境（如温度）不同，使用的玻璃管的粗细不同等等。这些都使得“加热指数”的设置要因人、因地而异。关于具体的“加热指数”，这里只能针对具体实验做个简单的介绍，用户可在这些参数上再行摸索。或者直接与工作人员，这样更能为不同的用户选择合适的玻璃管和具体的参数。为了方便操作，下面描述了一些有关拉制参数设置的资料以供参考：

1. 目前教学使用zui多的是“心肌细胞动作电位”实验。因为实验的时候是“盲插”，所以首先要保证电极的耐用性，因此要求电极的不能过长。建议选用6圈的加热丝（附件中加热丝的长度分别为7圈、6圈和5圈）；选用2个小砝码合并；加热参数设置在400到600范围内（如果室温过高或过底，可以适当降低或升高）；选用“一次拉制”方式，这样成型的电极阻抗在10M左右，也比较短。

2. 有些实验常常是针对某部分组织或核团进行电信号的引导。这样的电极是对阻抗要求是比较高的（15M以上）。建议选用6圈（或7圈）的加热丝；可选用1个大砝码（可根据具体的要求来定，一般来说选用大砝码成型的电极阻抗要高于小砝码的）；加热参数可设置在700或更高，这样成型的电极阻抗较高，比较细长。一般来说，增加砝码是可以提高阻抗。

3. 如果是用于细胞外的实验，那对电极的阻抗要求就低（5M以内）。可选用5圈的加热丝；用2个小砝码；加热参数设置在400以内，这样拉制成的电极的“部”短、细，易与打磨、修饰。

注意：上述的参数是针对1.5mm的玻璃管拉制，若拉制其它型号的玻管，需另行参考（可跟厂商技术人员）。

五、仪器维护

精心维护保养可延长本机的使用寿命。

1. 常注意机身表面的清洁：可用浸有少量酒精的软布清洁表面的污垢。

     （注意：清洁时应拔掉电源插头，且勿让任何液体浸入机内以免损坏。）

2、长期不用时应将机身用软布盖上，并置于阴凉干燥处。

3、拉制时产生的碎玻璃管会掉入砝码罐中，下面有可开关的小平台。可把碎玻

管及时清除。

4、如果觉得仪器出现问题或者有不明白之处，请及时与厂商。

微电极的灌制

微电极拉制好后，接下来就是电极的灌制。

拉制好的微电极（如右图4）“茎部”一般有3cm长（甚至更长），所以用注射针是无法深入微电极的“肩部”进行灌制的，这就需要在针头上接上根细管来延长。灌制的步骤如下：

1. 将微电极的“端部”轻轻的放在需要灌制的溶液里，利用虹吸效应从“端部”灌制极少量的溶液；

2. 从“茎部”利用延长管深入到“肩部”和“锥部”之间，轻推注射器（5ml），随溶液的溢出而逐渐抽出延长管；

3. 这时，在电极的“锥部”聚集了很多细小的气泡，将微电极“端部”朝上，固定后整个浸入溶液里（如果只有一、两个气泡，也可部分浸入）；

4. 直至气泡*从电极中消失，再取出，用干净的纸（或棉）将电极“茎部”的外侧擦拭干净，以免附在外表的溶液影响了电极的导电性能（用带有蒸馏水的纸或棉来擦拭，效果会更好）。

这样，微电极就灌制完毕。