标签: 限制性内切酶 消化 DNA
影响限制性内切酶反应的因素很多。DNA制品中的污染均能抑制酶切活性。这种抑制可通过增加酶作用单位数、增大反应体枳以稀释可能的抑制剂或延长反应时间来加以克服。
实验方法
实验方法原理 | 进行限制酶切割反应只需简单地将酶和DNA样品放在合适的反应缓冲液温育,其中DNA和酶的量、缓冲液的离子强度、温育温度和时间都依具体的反应而改变。 |
---|---|
实验材料 | DNA |
试剂、试剂盒 | TE 酶切缓冲液 EDTA |
仪器、耗材 | 电泳仪 |
实验步骤 | 1. 混合下列溶液于一个无菌的微量离心管中
2. 加入限制性内切酶(1~5 U/μg DNA)在推荐的温度温育1 h (—般是37℃)。
5. 加入5 μl 电泳加样缓冲液终止反应,进行琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳。
|
核酸纯化试剂盒 K0481 GeneJET™ Plasmid Midiprep Kit 25 preps
K0222 Maxima® SYBR Green/ROX qPCR Master Mix (2X) 1000 rxns
K0221 Maxima® SYBR Green/ROX qPCR Master Mix (2X) 200 rxns
K0242 Maxima® SYBR Green/Fluorescein qPCR Master Mix (2X) 1000 rxns
K0241 Maxima® SYBR Green/Fluorescein qPCR Master Mix (2X)
K0251 Maxima® SYBR Green qPCR Master Mix (2X), ROX solution