徕卡生物显微镜VS光学显微镜
光学显微镜中所用的可见光源是波长为400一800nm的电磁波。波传播的特性之一是衍射。衍射就是波遇到障碍物时能偏离直线传播的性质。根据基础物理知识可知，由于实际光学仪器都有限制光束的“窗口”（光学显微镜中的“窗口”就是物镜边缘所限制的透光范围），徕卡生物显微镜造成的衍射效应会使每个物点形成的像都是有所扩展的衍射光斑。靠得太近的像点彼此重登起来，会使画面中的细节变得模糊不清。光学显微镜中还有一些像差（如球差和色差等）也会使像点展宽，但它们大多可以校矫正。所以衍射差就成了限制光学显微镜分辨率的*重要因素。
根据
徕卡生物显微镜成像原理可以得出：一个物点所形成的衍射像斑是一种强度大部分（约84％）集中在中心圆斑，而周围伴有强度逐渐减弱的若干离散同心环的衍射花样。中心圆斑（也称A卸因斑）的半径。约为：n、o．6l扇式中A一显微镜像方所用介质中的光波长；久一物镜光闲（即物境“窗口”）对像点所张的半角．亦稼像方物镜孔径角或电子束半张角。光学仪器中通常采用Rayl出gh判据作为分辨率的标准，即当一个囚斑像约中心刚好落在另一相邻圆斑像的边缘上时，这两个俄恰好能被分辨。因此图像上可分辨的zui小距离众就是Airy团斑的半径。。利用介质中的可见光波长入与真空中可见光波长J的关系入＝4／q（q是物镜像方所用介质的折射率），是物镜与物之间介质的折射率，gd是物镜光阑对物点所张的半角，灯是显微镜物镑所决定的图像放大倍数），便可以把像上的分辨率品转换成对物方样品的分辨率成，通常被称为
徕卡显微镜的数值孔径。
因可见光的波长局限在400nm到800nm之间，故若要缩小可分辨距离久，就必须增大数值孔径。但是为此只能靠提高勒的值，具体做法可以是在载物片与物镜之间加油滴等，但山的zui大值约为L5，zui大张角60约为70‘。而徕卡生物显微镜zui小分辨率极限接近o．2Pm（即200nm）。由于人暇的分辨串约为o．2mm，因此要求光学显微镜的zui高放大倍数也只是1000倍左右。可以更好的看清被检物。以这个性能来衡量，便可得知用光学显微镜看不清真正的细脑膜、细胞器的微结构，也看不见病毒和大分子。
