上海纳锘实业有限公司
2013/9/11 15:39:13
在液相色谱仪的操作过程中，经常会产生一些基线噪音，如何在使用过程中来避免这些噪音的产生，在本文中会为大家做一详细介绍。
1.流动相的在线混合
所有的流动相在线混合都是从方便出发的结果，流动相混合的不充分是基线噪音的一个重要
来源。混合方式主要有两种：
a．低压混合：采取时间脉冲的方式，利用比例阀，将不同流动相按一定比例混合。
b．高压混合：利用多个泵，控制每个泵的流量，将不同的流动相按一定比例混合。
在流动相混合后，一般都有一个混合器（Mixer）来帮助混合，使之更加充分。从流动相开始
混合在一起，到流动相到达色谱柱头，这一段体积叫做延迟体积（Delay Volume）。Mixer体积
越大，混合越好，但是相应延迟体积就越大，造成梯度的延迟。换句话说，就是流动相的变化，
需要一定时间后，才能真正到达色谱柱，对分离产生影响。这个现象在使用UPLC或者UHPLC
的时候，会有比较明显的作用。
为什么相同梯度方法，在不同仪器，或者不同品牌的仪器之间转化时，保留时间可能不一样？
其主要原因就是延迟体积的不同。
在线混合很难做到非常均一的混合效果，这个在示差检测器（RID）上的效果zui明显。这也
是为什么示差检测器都要求将流动相预混到一个瓶子里，不能走梯度的原因。
那如何减小因为混合而造成的基线噪音呢？
a.对于等度的方法，非常简单，预混流动相就可以了。
b．对于梯度的方法，部分预混流动相也会帮助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。
方法要求乙腈/水比例从10%走到85%。 那可以将流动相A配成10%的乙腈，流动相B
配成85%的乙腈，然后A/B梯度从0%走到100%。 这就是部分预混。
c．增大Mixer的体积。一般mixer的体积从几百ul到几个ml都有，在允许的延迟时间下，
更换一个体积更大的Mixer，能够有效提高混合的效率。每个色谱生产厂家的Mixer体积都不一样，基本都可以混用。
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