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猪肉和牛肉组织中头孢菌素类抗生素的固相萃取净化方法

北京东方惠普科技有限公司

2010/5/27 9:09:15

 

猪肉和牛肉组织中头孢菌素类抗生素的固相萃取净化方法
1. 萃取
a. 10g肌肉样品中加入40mL醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L),匀浆;
b. 加入10mL异辛烷,用漩涡混合器混合均匀;
c. 2400r/min离心10min;
d. 将上清液转移到玻璃试管中。
2. SPE净化
a. 活化:分别用5mL甲醇,5mL超纯水以及5mL醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L)分别淋洗C18吸附剂柱床;
b. 上样:将玻璃试管中萃取后的上清液倾倒入SPE中;
c. 淋洗:用2mL的醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L),1mL的超纯水和1mL的去离子水/乙腈( 90:10,V/V) 分别淋洗柱床,去除干扰杂质;
d. 干燥:柱管通空气,抽气5min;
e. 洗脱:加2mL去离子水/乙腈(90:10,V/V)洗脱液,进行洗脱,流速控制在3mL/min,收集洗脱液;
f . 氮吹干燥:50℃ 条件下,氮气吹扫,蒸发至大约4μL左右;
g. 定容:用醋酸铵缓冲液(pH7.0,0.025mol/L)和0.1M的NaOH调节到pH7.0,并定容至1.6mL。
3. LC-UV检测
4. 样品成分
头孢喹诺
头孢氨苄
头孢匹林及其代谢物Desacetylcephapirin
头孢噻呋及其代谢物Desfuroylceftiofur
本方法中使用的SPE柱:
Bond Elut C18( 500mg, 6mL, PN.12102052 )。
 

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