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试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：人抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒定性测定人血液、或其它相关组织中抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）
实验原理：
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人抗幽门螺旋菌抗体 IgM
（HP-IgM）。用纯化的抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）抗原包被微孔板，制成固相抗原，
可与样品中抗幽门螺旋菌抗体 IgM（HP-IgM）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的抗幽门螺旋菌抗体 IgM（HP-IgM）抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗
原复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在
酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF
值相比较，从而判定标本中人抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）的存在与否。

试剂盒组成：
1 20 倍浓缩洗涤液 30ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1/瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张  
6 显色剂B液 6ml×1 瓶 12 密封袋 1 个

标本要求：
1．标本处理：血清、血浆标本可直接检测
2．标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测，可将标本在-20℃保存一个月，
但应避免反复冻融。
3．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不
触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。    
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。

8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。

结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
    临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
    阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为人抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）
阴性
    阳性判定：样品OD值≥ 临界值（CUT OFF）者为人抗幽门螺旋菌抗体IgM（HP-IgM）
阳性

注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须
注意安全。
规格：
          96人份/盒
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月