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详说免疫试剂的特异性|比例|敏感性

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2014/9/19 10:15:23

    今天是本周的zui后一个工作日了,在明后两天中如果您有需要咨询的产品价格及技术信息可在本中留言。今天上海恒远为您详说免疫试剂的特异性|比例|敏感性。
·特异性
    抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。
    但是这种特异性也不是的。假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交叉反应。用hCG免疫动物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG两种抗体,抗α-hCG抗体将与LH中的 
    α酶位发生交叉反应。在临床检验中,如用抗hCG抗血清作为妊娠诊断试剂检定尿液中hCG,只能用于hCG浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH将与之发生交叉反应。因此在作为早孕诊断(敏感度应达到50mIu/mlhCG)的实际中必须应用只对hCG特异的抗β-hCG,以避免与其它激素的交叉反应的发生。
    
·zui适比例
     在恒定量的抗体中加入递增量的抗原形成抗体复合物的量。曲线的高峰部分是抗原抗体比例zui合适的范围,称为等价带。在等价带前后分别为抗体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象。抗体过量称为前带,抗原地过量称为后带。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
    免疫试剂测定是一种很敏感的测定方法,抗原抗体反应后直接测定形成的沉淀或浊度,敏感度可达5~10μg/ml,但在临床检验中,某些待测物在标本中的含量远低于这一水平,因此要寻找增加敏感度的方法。标记的免疫测定是将检测试剂中的抗原或抗体用可微量测定的物质加以标记,通过测定标记物来提高敏感度。在放射免疫测定和酶免疫测定中,标记物分别为放射性核素和酶,zui后用测定放射性和酶活力来计算待检物的量,敏感度可比直接测定沉淀物提高数百至数千倍。在标记免疫测定中,一般加入过量的标记试剂以保证与待测物*反应。
·敏感性
    在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放射免疫测定法或免疫试剂测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng/ml。
       

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