鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运

（1）鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒严重溶血，以HRP 为标记的ELISA 测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性； 
（2）混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；
（3）如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应； 
（4）标本凝固不全，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果； 
（5）采血试管洗涤不*、反复使用易交叉污染； 
（6）塑料试管能吸附抗原物质 ，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。 
ELISA结果判定常用的几种方法：
1）目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于（竞争法则浅于）阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2）以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3）以P／N值（阳性孔OD值／阴性孔OD值）大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4）定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。