1.
农残试剂配置
缓冲溶液：
取一包缓冲剂，
加入
500ml
蒸馏水，
溶解搅拌均匀，
密闭、
避光、
阴凉处保存。
显色剂：取显色剂一瓶，加入
15ml
缓冲溶液溶解，
4
℃冰箱中保存。
底物：取底物一瓶，加入
15ml
蒸馏水溶解，
4
℃冰箱中保存。
乙酰胆碱酯酶：
取乙酰胆碱酯酶一瓶，
用
3ml
缓冲溶液溶解，
4
℃冰箱中保
存。
2.
样品处理
选取有代表性的蔬菜样品，
擦掉样品表面泥土，
剪成
1cm
见方碎片，
取样品
1g
，放入烧杯或提取瓶中，加入
5ml
缓冲溶液，振荡
1min
～
2min
，倒出提取液，
静置
3min
～
5min
，待用。
注意：
样品不可用水冲洗，
应擦去表面泥土等杂物后取样。
为了保证取样具有代
表性，
叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，
果菜从不同个体的表皮处取
样。
3.
对照溶液测试
在提取瓶中加入
2.5ml
缓冲溶液，再加入
100ul
酶液、
100ul
显色剂，摇匀
后于
37℃放置
15
分钟
(
每批样品的控制时间必须一致
)
。
15
分钟后再加入
100
μ
L
底物摇匀
,
此时检液开始显色反应
,
应立即倒入
1cm
比色皿，放入仪器比色池中，
将仪器调到测量界面
,
按操作指示面板按键区的
“对照”
按钮，
仪器开始做对照。
3
分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。
注意：对照测试必须在*通道进行，对照测试△
A
应＞
0.3
，若对照测试
的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”
，须重新做对照，以保证
测量结果的准确性。
(
对照测试△
A<0.3
的原因：一是酶的活性不够，二是反应
温度太低。
)
4.
样品溶液测试
另取干净的提取瓶，放入
2.5ml
样品提取液，加入
100ul
酶液、
100ul
显色
剂，摇匀后于
37℃放置
15
分钟
(
放置的时间与对照液放置的时间必须一致
)
。
15
分钟后再加入
100
μ
L
底物摇匀
,
此时检液开始显色反应
,
应立即倒入
1cm
比色皿，
放入仪器比色池中，按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量，
3
分钟后
仪器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜
样品提取液对酶的抑制率≥
50%
时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类
农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验
2
次以上。
对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
5.
说明
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有
影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬
菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减
少色素的干扰。
