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酶学检测和ELISA支原体常用检测方法

上海一研生物科技有限公司

2015/5/15 10:50:04

DNA检测
 
DNA检测需要将可疑样品与指示细胞共同培养,ELISA试剂盒因此一般需要几天时间。DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞,如果原样本中含有支原体,那么当细胞DNA被荧光染料(如Hoechst染料)染色时,就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。分离培养法用来检测支原体M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以准确的将其检测出来。
 
PCR法
 
PCR法也可以检测M. hyorhinis菌株,PCR法检测支原体只需几个小时,是zui快但也是zui不灵敏的支原体检测方法。该方法采用针对支原体DNA的引物用PCR检测可疑样本,其中PCR引物通常针对支原体的16S rRNA基因。在凝胶电泳过程中,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见同时使用另一种检测方法来进行验证。
 
酶学检测和ELISA试剂盒
 
此外,也还存在一些其他支原体检测方法。例如酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中,在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化为ATP,随后能利用ATP发光的luciferase酶就可以指示支原体的存在。ELISA也能用于支原体检测,以ELISA法为基础的支原体检测一般使用针对支原体16S rRNA基因的带标记探针或抗体,来检测培养物中是否含有支原体。
 
定期检测
 
支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎,因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。将定期支原体检测常规化坚持下去,是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。

110892-200403 积雪草苷 对照品 鉴别 20mg
110893-200201 羟基积雪草苷 对照品 鉴别 20mg
110894-200503 甜菜碱 对照品 含量测定 50mg
110895-200404 雪上一枝蒿甲素 对照品 供比色法含量测定用 20mg
110896-200202 琥珀酸 对照品 鉴别 20mg
110897-200001 α-蒎烯 对照品 含量测定 0.5ml
110898-200202 γ-亚麻酸甲酯 对照品 含量测定 0.2ml
110899-200302 二十八烷醇 对照品 含量测定 10mg
ELISA试剂盒110900-200405 祖师麻甲素 (曾用名:瑞香素) 对照品 含量测定 20mg
111501-200001 尿囊素 对照品 含量测定 50mg
111502-200402 大豆苷元 对照品 鉴别 20mg
111503-200001 芳樟醇 对照品 鉴别 50mg
111504-200001 D-果糖 对照品 鉴别 30mg

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