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哈灵实验室教大家凝胶制备中有哪些方法

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2015/6/12 13:35:22

哈灵实验室教大家凝胶制备中有哪些方法

凝胶制备中有哪些方法

凝胶制备:

1.玻璃板对齐后放入夹中,垂直卡紧,加满水检漏。

2.配10%分离胶,APS和TEMED作用为促凝,后灌胶前加。若板不漏水,则将水倒出,并用吸水纸洗净后灌胶,灌至大约3/4处,上面加满水压平。

3.配浓缩胶,同样地,APS和TEMED后加,分离胶灌入约30min后观察小烧杯中剩余分离胶是否已凝,同时仔细观察可见玻板水和胶间有一条折线,说明胶已凝固。

4.将上面的水倒去,吸水纸洗净,灌入浓缩胶,灌满,注意一定不要有气泡,然后将梳子插入,注意保持水平,约30min后凝固可用。

5.拔梳子在电泳缓冲液中拔,加样孔用小针筒冲洗干净再上样,注意上样时勿使样品逸至邻孔,样品混匀时要轻,不要产生气泡,否则加样时易导致逸出而使结果不准确。

上海哈灵生物科技有公司以*产品为标准,自主研究开发了一系列应用于分子生物学、蛋白质学、免疫学研究的相关产品,并代理了国外 gibco/ elisa/Amresco/Sigma/Pharmacia等品牌的生物试剂,力争成为生物技术的产品供应商。   

 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。欢迎新老客户详细信息。

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