水饱和酚配制

水饱和酚配制及作用

水饱和酚是用柠檬酸饱和过的重蒸酚，为无色透明的液体，有刺激性气味，上层为柠檬酸溶液层，pH＜5.5，下层为酚相。本品不含 8-羟基喹啉，通常与异硫氰酸胍一起使用，用于 RNA 的提取。
配制方法：把苯酚加入蒸馏水，起初呈无色，再加就变为白色混浊，水面有少量油滴，白色混浊即饱和了，所以出现白色浑浊之后沉淀取清液即为水饱和酚。组织裂解液，加入 0.1 体积 2 mol/L 醋酸钠(pH 4.0，以保持溶液 PH 值为酸性)，再加入 1 体积的水饱和酚（使用时静置，取下层酚相使用。上层为柠檬酸溶液，是为阻止酚与空气接触，以减缓酚的氧化），0.2 体积氯仿：异戊醇(49：1) ，振荡 10 秒钟后冰浴 15分钟。离心后取水相（上层）加等体积异丙醇沉淀 RNA，75%乙醇漂洗 1 次，微干燥后溶于10μl DEPC 处理水中备用。
水饱和酚有较强的腐蚀性，应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色，表明已发生氧化，不能继续使用。
北京索莱宝科技有限公司自产产品水饱和酚 W0250（pH＜5.5），用于 RNA 的提取实验。
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