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水饱和酚配制

北京索莱宝科技有限公司

2015/8/24 14:04:21

水饱和酚配制及作用

水饱和酚是用柠檬酸饱和过的重蒸酚,为无色透明的液体,有刺激性气味,上层为柠檬酸溶液层,pH<5.5,下层为酚相。本品不含 8-羟基喹啉,通常与异硫氰酸胍一起使用,用于 RNA 的提取。
配制方法:把苯酚加入蒸馏水,起初呈无色,再加就变为白色混浊,水面有少量油滴,白色混浊即饱和了,所以出现白色浑浊之后沉淀取清液即为水饱和酚。组织裂解液,加入 0.1 体积 2 mol/L 醋酸钠(pH 4.0,以保持溶液 PH 值为酸性),再加入 1 体积的水饱和酚(使用时静置,取下层酚相使用。上层为柠檬酸溶液,是为阻止酚与空气接触,以减缓酚的氧化),0.2 体积氯仿:异戊醇(49:1) ,振荡 10 秒钟后冰浴 15分钟。离心后取水相(上层)加等体积异丙醇沉淀 RNA,75%乙醇漂洗 1 次,微干燥后溶于10μl DEPC 处理水中备用。
水饱和酚有较强的腐蚀性,应尽量避免皮肤接触或吸入体内。如发现变为红色或棕色,表明已发生氧化,不能继续使用。
北京索莱宝科技有限公司自产产品水饱和酚 W0250(pH<5.5),用于 RNA 的提取实验。
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