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2015/8/27 8:39:35革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,是将未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。今天为大家介绍一下革兰氏染色法的具体实验步骤。
革兰氏染色法的实验流程:
1、 取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用马克笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂。
2、 涂片:
液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,zui后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
3、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。
4、 固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
5、 染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min。
6、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
7、 媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗。
8、 脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗。
9、 复染:滴加蕃红复染3-5min,水洗。至此,革兰氏染色结束。
完成革兰氏染色法实验,就需要使用革兰氏染液,但同时也会出现实验误差,如果需要了解更多相关知识,本公司技术人员,购买本公司产品,我们有专门技术人员指导,期待您的来电!