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细胞常规培养传代流程

上海极威生物科技有限公司

2015/11/4 20:45:49

(请严格遵照无菌操作)

1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3

 ml0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在

1-2min)

2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消

化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培养基,轻轻吹打细胞

层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培

养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养

4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞

密度达到80%以后重复1项操作或者冻存

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